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產品名稱:FHs 74 Int人小腸上皮細胞、FHs 74 Int人小腸上皮細胞、FHs 74 Int人小腸上皮細胞、FHs 74 Int人小腸上皮細胞細胞描述 該細胞為正常的二倍體細胞,不具備無限增殖的能力。建議用戶收到細胞后,在細胞倍增5~8次內完成實驗。 細胞特性 1)來源:小腸 2)形態(tài):上皮樣 3) 含量:>1x106 個/mL 4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性 5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝 運輸和保存 可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式 (1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇; (2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。 細胞用途: 僅供科研使用。 細胞接收后的處理: 1) 收到細胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。 2) 在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)時,在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,能準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B(tài)請在10X和20×物鏡下,同時給剛收到的細胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態(tài)的依據。 3) 觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。 4) 貼壁細胞:在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現象,如發(fā)現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長,可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。 5) 懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基)。 6) 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。 細胞培養(yǎng)步驟 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1) 準備Hybri-Care Medium (ATCC, 46-X)培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;rhEGF(Sigma, SRP 3027-500μg)30 ng/ml;雙抗,1%; 2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。 二. 細胞處理: 1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法: 1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2ml培養(yǎng)基終止消化。 3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。 4. 收到細胞后傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據實際情況按1:2到1:5的比例進行。 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。 下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。 3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
南京萬木春生物科技有限公司(Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國內外市場專業(yè)研發(fā)、生產和銷售細胞、 外泌體、ELISA 試劑盒、 抗體、重組蛋白及相關試劑。產品在免疫學、信號轉導、代謝、 神經科學等領域內都有科學文獻發(fā)表,被國內外多所大學、研究機構和藥學平臺使用并發(fā)表文獻多達1000多次。我公司憑借優(yōu)異的產品和完善的服務 體系現已受到廣大國內外用戶的青睞和認可。
品牌優(yōu)勢
1、產品優(yōu)勢:產品具有高特異性、回收率高、線性好、變異系數低、穩(wěn)定性好;
2、質量保證:產品質量穩(wěn)定,每批次產品必須通過 QA、QC 檢測才可出庫;
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6、研發(fā)、生產科研產品:ELISA 試劑盒:人、大小鼠、牛、兔、山羊、倉鼠、豬、馬、雞、犬、豚鼠、猴、綿羊等多種屬1000多種指標;
抗體:兔多抗、鼠單抗種類豐富,一抗 1 萬余種,二抗 100 多種;
重組蛋白:多項發(fā)明,原核表達系統(tǒng)穩(wěn)定表達蛋白 1000 余種。
tumor-bearing NOD-SCID mice simultaneously with intraperitoneal administration of IL-2 (3000 IU per mouse) on Day 7. Tumor volume was determined by calliper measurement of perpendicular diameters of each tumor and was calculated using the following formula: tumor volume (mm3) = [(length) 9 (width) 9 (width)]/2.
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