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大鼠胃動(dòng)素(MTL)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 |
酶聯(lián)免疫吸附測定(enzyme linked immunosorbent assay,簡寫ELISA或ELASA)指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體特異性結(jié)合進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)為免疫學(xué)中的經(jīng)典實(shí)驗(yàn),本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點(diǎn)等方面對其進(jìn)行了詳細(xì)介紹。
中文名
酶聯(lián)免疫吸附劑測定
外文名
enzyme linked immunosorbent assay
簡寫
ELISA或ELASA
類型
概念
大鼠胃動(dòng)素(MTL)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
大鼠(MDA)elisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法 1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。 3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。 4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液 5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 |
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