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豬免疫球蛋白E(IgE)酶聯免疫吸附測定試劑盒 |
本試劑盒用于測定血清、血漿及相關液體樣本中待測物質的含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中待測物質水平。用純化的待測物質抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測物質,再與HRP標記的待測物質抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中待測物質濃度
豬免疫球蛋白E(IgE)酶聯免疫吸附測定試劑盒 |
[操作步驟] 1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。 2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL; 3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。 4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。 6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。 7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值 |
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