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液相色譜檢測體外循環(huán)管道中DEHP在血液中的溶出量
體外循環(huán)(extracorporeal circulation)是利用一系列特殊人工裝置將回信靜脈血引流到體外,經(jīng)人工方法進行氣體交換,調(diào)節(jié)溫度和過濾后,輸回體內(nèi)動脈系統(tǒng)的生命支持技術。體外循環(huán)裝置(人工心肺機)由人工心(血泵)、人工肺(氧合器)、變溫器、管道、濾器、操縱臺及電子儀器等部分組成。在機體與血槽、血槽與氧合器、氧合器與動脈血泵之間,均需以管道相連接。要求管道內(nèi)壁光滑、硅化,口徑變換處要求逐漸變細,無楞角,無粗糙邊緣,以減少阻力、壓力差和渦流。
目前的一次性使用體外循環(huán)管道大多數(shù)采用鄰苯二甲酸二(2-乙基)己基酯(Di-(2-ethylhexylphthalate,DEHP)增塑的聚氯乙烯管。DEHP是zui廣泛使用的增塑劑,除了乙酸纖維素、聚乙酸乙烯外,與絕大多數(shù)工業(yè)上使用的合成樹脂和橡膠均有良好的相容性。本品具有良好的綜合性能,混合性能好,增塑效率高,揮發(fā)性較低,低溫柔軟性較好,耐水抽出,電氣性能高,耐熱性和耐候性良好。
DEHP具有慢性毒性,長期積累會影響肌肉骨骼系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)等。它是一種脂溶性物質(zhì),在體外循環(huán)管道中會隨著全血、血漿等進入到人體。
儀器設備:
LC-600A等度智能全控液相色譜系統(tǒng)(南京科捷分析儀器有限公司)由1臺P600高壓恒流泵與1臺UV600紫外檢測器直接構成等度分析系統(tǒng)。
使用WS600工作站可以同時控制數(shù)臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等,實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。
廣泛應用于研究開發(fā)、醫(yī)藥檢驗、食品檢測、化工分析、環(huán)境監(jiān)測等眾多分析領域。
樣品處理:
準確吸取1mL的全血浸提液樣品與乙腈按一定體積比混合,渦旋震蕩數(shù)后離心10min,取上清液過0.22μm濾膜得到樣品,按照下文分析條件進樣測定得到峰面積值,通過線性回歸方程計算得到樣品檢驗液中DEHP濃度(CA,μg/mL)。
分析條件:
精密稱取DEHP標準品2.0010g,用甲醇稀釋至100mL,得到濃度為20.01mg/mL的標準儲備液。取標準儲備液,用甲醇稀釋200倍,得到0.10mg/mL的標準工作溶液,用UV1800紫外可見分光光度計(南京科捷分析儀器有限公司)在190~1100nm范圍內(nèi)進行掃描,根據(jù)吸收光譜曲線確定液相色譜檢測波長(n)。
色譜條件:
檢測器 | UV600紫外檢測器 |
色譜柱 | C18,150mm×4.6mm,5μm |
檢測波長 | 271nm |
柱溫 | 室溫 |
流動相 | 甲醇(色譜純) |
流速 | 1.0mL/min |
進樣量 | 5μL |