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目錄:北京蘭博利德商貿(mào)有限公司>>細(xì)胞與免疫學(xué)試劑>>轉(zhuǎn)染試劑>> LabFect原代細(xì)胞小核酸轉(zhuǎn)染試劑

LabFect原代細(xì)胞小核酸轉(zhuǎn)染試劑
  • LabFect原代細(xì)胞小核酸轉(zhuǎn)染試劑
參考價(jià)3680
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

參考價(jià):¥ 3680

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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規(guī)格

1ml

屬性

供貨周期:現(xiàn)貨 規(guī)格:1ml 貨號(hào):T1014

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規(guī)格
1ml3680元9999支可售

更新時(shí)間:2022-08-17 11:01:01瀏覽次數(shù):351評(píng)價(jià)

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1ml
貨號(hào) T1014
LabFect原代細(xì)胞小核酸轉(zhuǎn)染試劑可用來(lái)轉(zhuǎn)染 siRNA、antisense RNA、microRNA等200bp以內(nèi)的小分子RNA和DNA,可轉(zhuǎn)染絕大多數(shù)原代細(xì)胞。

LabFect原代細(xì)胞小核酸轉(zhuǎn)染試劑


貨號(hào)T1014

存儲(chǔ)條件:藍(lán)冰運(yùn)輸,4°C保存,超一個(gè)月不用于-20°C儲(chǔ)存,避免反復(fù)凍融。-20℃保存條件下,有效期為1年。

產(chǎn)品說(shuō)明

LabFect可用來(lái)轉(zhuǎn)染 siRNA、antisense RNA、microRNA等200bp以內(nèi)的小分子RNA和DNA,可轉(zhuǎn)染絕大多數(shù)原代細(xì)胞。 目前,無(wú)論國(guó)外還是國(guó)內(nèi),原代細(xì)胞的核酸轉(zhuǎn)染都是個(gè)熱點(diǎn)難題,市場(chǎng)還缺乏真正有效的商品化的原代細(xì)胞核酸轉(zhuǎn)染試劑。LabFect能夠高效轉(zhuǎn)染絕大多數(shù)原代細(xì)胞,獲得比較理想的基因敲除效果。甚至對(duì)一些活體寄生蟲(chóng)幼蟲(chóng),LabFect也能獲得較為理想的轉(zhuǎn)染結(jié)果。對(duì)于大多數(shù)原代細(xì)胞,LabFect的細(xì)胞轉(zhuǎn)染陽(yáng)性率都在80%以上,而轉(zhuǎn)染細(xì)胞死亡率不到10%。LabFect的使用也極其簡(jiǎn)便,先將siRNA與LabFect室溫混合,再將siRNA-LabFectPM混合物直接加入含培養(yǎng)基的細(xì)胞,血清對(duì)轉(zhuǎn)染效果沒(méi)有影響,不必刻意添加或更換培養(yǎng)液。

產(chǎn)品特點(diǎn)

卓yue的原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染性能:細(xì)胞轉(zhuǎn)染陽(yáng)性率一般在80%以上,基因敲除效果明顯,肝細(xì)胞 Lamin A/C 基因敲除效率在95%以上;

極低的細(xì)胞毒性:轉(zhuǎn)染細(xì)胞死亡率不到 10%,大大降低了因細(xì)胞毒性 對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響;

轉(zhuǎn)染細(xì)胞范圍廣,絕大多數(shù)原代細(xì)胞都能獲得比較理想的轉(zhuǎn)染結(jié)果。

應(yīng)用

siRNA 轉(zhuǎn)染

antisense RNA 轉(zhuǎn)染

200bp 內(nèi)的小分子 DNA 轉(zhuǎn)染

操作步驟

本說(shuō)明書(shū)適用于24孔培養(yǎng)板的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),其他規(guī)格的培養(yǎng)板的用量參照下面表格,表格給出的是每孔的用量與體積。

1. 細(xì)胞接種

轉(zhuǎn)染前一天接種細(xì)胞,每孔500μl培養(yǎng)基,使細(xì)胞在轉(zhuǎn)染時(shí)密度在30-50%,盡量不要使用抗生素。

2. siRNA-LabFect混合物準(zhǔn)備

a. 6pmol siRNA用50μl無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋。

b. 2μl LabFect 用50μl無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋。輕輕混勻,室溫孵育 5min。注意:確保在25 min內(nèi)執(zhí)行第三步操作,不要過(guò)于延遲。

c. 孵育5min后,將siRNA稀釋液與LabFect稀釋液混合(總體積100μl)。輕輕混勻,室溫孵育20 min。

3. 將混合物加到培養(yǎng)的細(xì)胞內(nèi)(*培養(yǎng)基培養(yǎng)):

a. 100μl混合物加入培養(yǎng)孔內(nèi),培養(yǎng)孔內(nèi)含有0.5ml培養(yǎng)的細(xì)胞。輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)板,混勻。

b. 37°C 培養(yǎng) 18-72h,檢測(cè)基因抑制效果。如果需要,細(xì)胞培養(yǎng) 4-6h 時(shí)可以更換培養(yǎng)基,但不是必須。孵育時(shí)間的長(zhǎng)短,取決于細(xì)胞類型、 所干擾基因本身及分析方法??稍O(shè)置不同的孵育時(shí)間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)以確定最jia孵育時(shí)間。

轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)優(yōu)化:

為了提高轉(zhuǎn)染效率,最hao對(duì)轉(zhuǎn)染條件進(jìn)行優(yōu)化,特別是首ci使用。例如:24孔培養(yǎng)板,調(diào)整siRNA與LabFect試劑的用量。siRNA用量在0.6-30 pmol (final concentration 1-50 nM)之間調(diào)整,LabFect試劑用量在1.0-3.0μl之間調(diào)整。

轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)要點(diǎn):

轉(zhuǎn)染過(guò)程盡量不要使用抗生素,否則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡增加; 首ci實(shí)驗(yàn) siRNA 的用量設(shè)置在終濃度 10nM、30nM、50nM、100 nM 進(jìn)行摸索 ,后續(xù)實(shí)驗(yàn)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果修改。

質(zhì)量控制

本產(chǎn)品經(jīng)嚴(yán)格的質(zhì)量檢驗(yàn)證明,無(wú)生物污染

注意:

本產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)

 

LabFect Transfection Reagent Formats for Various Cell Culture Vessels

Surface area/well

Vol. of growth medium

Vol. of dilution medium

siRNA Amount

LabFect


(cm2)

(µl)

(µl)

     (pmol)

   (µl)

96-well

  0.3

100

2 x 10

        1.2

   0.4

48-well

  0.8

250

2 x 25

3

1

24-well

2

500

2 x 50

6

2

12-well

            4

1000

2 x 100

         12

4

6-well

  10

2500

2 x 250

         30

   10

 


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