植物氨基乙酰丙酸脫水酶(ALAD)ELISA試劑盒 返回列表頁(yè)

檢測(cè)原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被δ氨基乙酰丙酸脫水酶（ALAD）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的δ氨基乙酰丙酸脫水酶（ALAD）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品活性。

植物氨基乙酰丙酸脫水酶(ALAD)ELISA試劑盒組成：標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S5）濃度依次為：0、3、6、12、24、48 U/L

常見(jiàn)問(wèn)題及解答：

【加樣問(wèn)題】：加樣太快，無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加再孔壁上部的非包被區(qū)易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。所以加樣不可太快，要避免加在孔壁上部。

【邊緣效應(yīng)問(wèn)題】：聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體，在實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測(cè)定中，將板從室溫置于37℃恒溫箱，板也升溫時(shí)，在外周孔與中心孔質(zhì)檢可能存在一熱力學(xué)梯度。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液至板孔中時(shí)，將板和溶液均加熱至溫育溫度就可以很容易排除“邊緣效應(yīng)"問(wèn)題，并且可以提高測(cè)定的重復(fù)性。

【空白對(duì)照】：是指不加標(biāo)本、不加酶做對(duì)照?？瞻讓?duì)照在單波長(zhǎng)測(cè)量時(shí)顯得尤其重要。

植物氨基乙酰丙酸脫水酶(ALAD)ELISA試劑盒操作時(shí)需要注意的事項(xiàng)：

1.不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同，務(wù)必按照上海軒澤康生物所用產(chǎn)品說(shuō)明書嚴(yán)格操作，否則實(shí)驗(yàn)失敗后果自行承擔(dān)。

2. 我司僅對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé)，不對(duì)因使用試劑盒而造成的樣本消耗負(fù)責(zé)。請(qǐng)使用者在使用前合理考慮所需樣本量。

3.臨界值附近標(biāo)本波動(dòng)為正?，F(xiàn)象，任何試劑均不可避免。可以考慮將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。

4.加樣時(shí)樣品量誤差，對(duì)于陰或很陽(yáng)的標(biāo)本影響不大，但對(duì)閾值附近的標(biāo)本影響極大，建議校對(duì)加樣器。

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