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檢測原理:
科研小鼠N端前腦鈉素ELISA檢測試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被N端前腦鈉素(NT-proBNP)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的N端前腦鈉素(NT-proBNP)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
科研小鼠N端前腦鈉素ELISA檢測試劑盒性能:
1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:低檢測濃度小于1.0 pg/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。
4. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
實驗注意事項:
1) 為了避免交叉感染,配置不同濃度標準品,上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。
2) 混合或重溶蛋白溶液時,盡量避免起沫。
3) 每次孵育時,請使用正確的封板膠可保證結(jié)果的準確性。
4) 終止液上板書匈奴應同顯色底物上板順序一致;加入終止液后孔內(nèi)顏色由藍變黃;若孔內(nèi)有綠色,則表明孔內(nèi)液體未混勻請充分混合。
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