檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被轉(zhuǎn)化生長因子β（TGF-β）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的轉(zhuǎn)化生長因子β（TGF-β）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)ELISA試劑盒實驗前準備要點：

1. 準備各種實驗儀器及材料（如：37℃恒溫箱，450nm酶標儀、高速離心機、高精度加樣器及槍頭等等）

2. 按照生物實驗室安全防護條例，穿著實驗服并佩戴乳膠手套做好防護工作

3. 使用前應將試劑盒內(nèi)各試劑取出，平衡至室溫（至少30分鐘）

4. 嚴格按照說明書的操作方法進行操作。說明書以英文說明書為準。

樣品收集、處理及保存方法：

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

在實際操作中，除了挑選優(yōu)良試劑外，有必要嚴厲依照操作過程進行操作，一起做好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)控，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢查每一份標本，才能確保檢查質(zhì)量。ELISA試劑盒如今國內(nèi)已有適當數(shù)量的單位具有全自動酶標儀，這關(guān)于完成ELISA的規(guī)范化檢查起到了重要作用。小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)ELISA試劑盒實驗中遇到的問題上海軒澤康生物為您解答：

1. 問：是否可以使用不同試劑盒的組分？

上海軒澤康生物解答：每一個試劑盒包含具有特定批號的組件，以確保所有組件單獨以及試劑盒中所有其他組件都能達到最佳性能。對這些特定批次進行質(zhì)量控制測試。絕不建議用戶使用自己的組件或其他供應商試劑盒。
2. 問：我的標準曲線看起來很好，但我沒有在樣本中得到預期的信號，這是為什么？

上海軒澤康生物解答：樣品可能不含分析物。矩陣效應可能掩蓋檢測。確保按照我司試劑盒中說明書進行稀釋。稀釋，前請檢查以確保稀釋操作正確。過度稀釋可能導致樣品低于標準曲線的范圍。

3. 問：該如何洗板？

上海軒澤康生物解答：如果您使用的是自動洗板機，我們建議定期檢查校正，并在清洗前用洗板機緩沖液沖洗系統(tǒng)。手動洗板機也是如此?；蛘呤褂弥欣^器或洗滌瓶。用戶應小心確保所有內(nèi)容物都被吸入，并在無棉紙上輕敲干燥。