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定量蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

定量dànbáizhì印跡（Quantitative Western Blotting）旨在通過(guò)定量分析dànbáizhì的表達(dá)水平來(lái)揭示生物學(xué)過(guò)程。該技術(shù)基于傳統(tǒng)的dànbáizhì印跡（Western Blotting），但通過(guò)引入定量分析，使得研究人員能夠更jīngquè地測(cè)量目標(biāo)蛋白的表達(dá)量。定量dànbáizhì印跡即dànbáizhì免疫印跡法中的定量分析方法，通常也叫做 Western Blot。與 Southern Blot 或 Northern Blot 雜交方法類(lèi)似，但 Western Blot 法采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測(cè)物是dànbáizhì，“探針" 是抗體，“顯色" 用標(biāo)記的二抗。經(jīng)過(guò)聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）分離的dànbáizhì樣品，轉(zhuǎn)移到固相載體（如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附dànbáizhì，且能保持電泳分離的多肽類(lèi)型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的dànbáizhì或多肽作為抗原，與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng)，再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng)，經(jīng)過(guò)底物顯色或放射自顯影以檢測(cè)電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)dànbáizhì的定量分析。該技術(shù)能夠幫助科學(xué)家理解dànbáizhì在細(xì)胞內(nèi)的功能和作用機(jī)制，解析疾病過(guò)程中的dànbáizhì異常表達(dá)，為疾病診斷和治療提供關(guān)鍵的線索。在藥物研發(fā)過(guò)程中，定量dànbáizhì印跡可以用于評(píng)估藥物對(duì)特定dànbáizhì或信號(hào)通路的影響，進(jìn)而指導(dǎo)藥物的優(yōu)化和改進(jìn)。

一、定量dànbáizhì印跡的常見(jiàn)方法與技術(shù)流程

1、樣品制備與dànbáizhì轉(zhuǎn)移

將細(xì)胞或組織樣品通過(guò)裂解液處理獲得可溶性蛋白。接下來(lái)進(jìn)行dànbáizhì的電泳分離，通常使用SDS-PAGE技術(shù)。電泳完成后，通過(guò)電轉(zhuǎn)移儀將dànbáizhì從凝膠轉(zhuǎn)移到PVDF或NC膜上。

2、特異性抗體的使用

使用特異性抗體識(shí)別目標(biāo)蛋白是定量dànbáizhì印跡的核心。初級(jí)抗體與目標(biāo)蛋白結(jié)合，次級(jí)抗體與初級(jí)抗體結(jié)合，并通過(guò)酶或熒光標(biāo)記實(shí)現(xiàn)dànbáizhì的檢測(cè)?？贵w的選擇和優(yōu)化直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和靈敏度。

3、信號(hào)檢測(cè)與成像

信號(hào)檢測(cè)通常通過(guò)化學(xué)發(fā)光或熒光成像系統(tǒng)來(lái)實(shí)現(xiàn)。通過(guò)成像儀器獲取dànbáizhì信號(hào)的圖像，并使用軟件進(jìn)行定量分析。選擇合適的檢測(cè)方式和成像參數(shù)是獲取準(zhǔn)確定量數(shù)據(jù)的保證。

4、數(shù)據(jù)分析與定量

使用zhuānyè的軟件分析dànbáizhì印跡的數(shù)據(jù)，計(jì)算目標(biāo)蛋白的相對(duì)表達(dá)量。通常需要對(duì)照內(nèi)參蛋白以校正實(shí)驗(yàn)中的變異因素，確保定量結(jié)果的可靠性。

二、注意事項(xiàng)與常見(jiàn)問(wèn)題

1、樣品處理的標(biāo)準(zhǔn)化

樣品制備中的任何微小差異都可能導(dǎo)致定量結(jié)果的偏差，因此需要嚴(yán)格控制樣品處理的條件。

2、抗體的選擇與驗(yàn)證

選擇高特異性和高親和力的抗體，并在實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行驗(yàn)證是獲得可靠數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)。

3、信號(hào)的線性范圍

確保檢測(cè)信號(hào)處于線性范圍內(nèi)，以避免飽和現(xiàn)象對(duì)定量結(jié)果的影響。

4、背景噪聲的控制

適當(dāng)?shù)姆忾]和洗滌步驟有助于降低背景噪聲，提高信號(hào)的清晰度。

定量dànbáizhì印跡能夠?qū)Φ拓S度蛋白進(jìn)行檢測(cè)，且具有很高的特異性。引入內(nèi)參對(duì)照和標(biāo)準(zhǔn)曲線可以提高定量結(jié)果的jīngquè性和重復(fù)性。定量dànbáizhì印跡應(yīng)用廣泛，幾乎適用于任何類(lèi)型的dànbáizhì樣品，包括細(xì)胞、組織和體液等。百泰派克生物科技的定量dànbáizhì印跡服務(wù)以其高效、準(zhǔn)確的特性贏得廣大科研機(jī)構(gòu)的青睞。我們擁有經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)團(tuán)隊(duì)和成熟的技術(shù)流程，能夠?yàn)槟峁┝可矶ㄖ频膁ànbáizhì分析方案。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上先進(jìn)的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)先進(jìn)，填補(bǔ)技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題?？稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專(zhuān)有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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