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MCE 國際站:Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
品牌:MedChemExpress (MCE)
貨號:HY-K1073
中文名稱:Annexin V-FITC/PI 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒
存儲條件:-20°C,1年避光保存,避免反復(fù)凍融
產(chǎn)品活性:MCE Annexin V-FITC/PI 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒可方便、快捷的檢測細(xì)胞凋亡。經(jīng) Annexin V-FITC 和 PI 聯(lián)合染色后,正常細(xì)胞基本無熒光(Annexin V-/PI-),早期凋亡細(xì)胞呈綠色熒光(Annexin V+/PI-),晚期凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞則呈綠色和紅色熒光(Annexin V+/PI+)。
生物活性:MCE Annexin V-FITC/PI 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒采用 FITC 標(biāo)記的重組人Annexin V 檢測細(xì)胞凋亡。在正常細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸 (PS) 位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè);細(xì)胞凋亡早期, PS 會外翻到細(xì)胞膜外側(cè)。 Annexin V (膜聯(lián)蛋白 V)是一種 Ca2+ 依賴性磷脂結(jié)合蛋白,可與 PS 特異性結(jié)合,因此Annexin V 常作為檢測細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。Annexin V 經(jīng) FITC 標(biāo)記后可發(fā)綠色熒光,利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀可檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生。此外,本試劑盒中的碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液是一種不能穿透細(xì)胞膜的紅色熒光染料,可對凋亡晚期細(xì)胞及壞死細(xì)胞染色。經(jīng) Annexin V-FITC 和 PI 聯(lián)合染色后,正常細(xì)胞基本無熒光(Annexin V-/PI-)早期凋亡細(xì)胞呈綠色熒光(Annexin V+/PI-),晚期凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞則呈綠色和紅色熒光(Annexin V+/PI+)。
操作流程:細(xì)胞與 Annexin V-FITC 和 PI 孵育 1. 收集細(xì)胞:收集 1-5 × 105 個細(xì)胞。 懸浮細(xì)胞:1000 g 離心 5 min,棄去上清。加入 1 mL 預(yù)冷的 PBS 輕輕重懸細(xì)胞沉淀,1000 g 離心 5 min,棄去上清,保留細(xì)胞沉淀。 貼壁細(xì)胞:小心吸取細(xì)胞培養(yǎng)液保存?zhèn)溆?。加?PBS 洗滌后,加入適量胰酶消化液(盡量不含 EDTA,以免影響 Annexin V 和 PS 的結(jié)合)消化細(xì)胞。加入前面收集的培養(yǎng)液,輕輕吹打細(xì)胞,制成單細(xì)胞懸液,1000 g 離心 5 min,棄去上清。加入 1 mL 預(yù)冷的 PBS 輕輕重懸細(xì)胞沉淀,1000 g 離心 5 min,棄去上清,保留細(xì)胞沉淀。 注:建議胰酶消化液不含 EDTA。 2. 加入 195 μL Binding Buffer,輕輕重懸細(xì)胞。 3. 加入 5 μL Annexin V-FITC,輕輕混勻。 4. 加入 10 μL PI Stain,輕輕混勻。 5. 室溫下避光孵育 10-20 min。 注:孵育過程中可輕輕顛倒數(shù)次以加強染色效果。 6. 檢測與分析 6.1 流式細(xì)胞儀檢測:用流式細(xì)胞儀檢測熒光強度。 注: a. 流式檢測時,Annexin V-FITC 最大激發(fā)波長為 488 nm,最大發(fā)射波長為 525 nm,在 FL1 通道檢測;PI-DNA 最大激發(fā)波長為 535 nm,最大發(fā)射波長為 617 nm,在 FL2 或FL3 通道檢測。 b. 建議設(shè)置三組對照:未染色組、PI 單染組及 Annexin V-FITC 單染組。 6.2 熒光顯微鏡檢測:1000 g 離心 5 min,棄去上清,加入 50-100 μL Binding Buffer 輕輕重懸細(xì)胞沉淀,涂片后用熒光顯微鏡檢測熒光強度。
熱銷產(chǎn)品:Bay 60-7550 | AZD0156 | Bestatin | 7,8-Dihydroxyflavone | Iberdomide | Mitoxantrone | Neratinib | Octreotide (acetate) | PhiKan 083 | (Z)-Ligustilide
Trending products:Recombinant Proteins | Bioactive Screening Libraries | Natural Products | Fluorescent Dye | PROTAC | Isotope-Labeled Compounds | Oligonucleotides
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