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cas：336185-20-7，F(xiàn)M 2-10 是一種親脂性苯乙烯染料類膜電位熒光探針，主要用于檢測細胞膜電位變化，尤其在神經(jīng)科學和細胞生物學研究中具有重要應用價值。

化學本質(zhì)與基本性質(zhì)

• 化學名稱：N-(3-三乙銨丙基)-4-(4-(二乙氨基)苯乙烯基)吡啶二溴鹽

• 分子量：555.43 g/mol

• 外觀：固體

• 溶解性：

• 溶于水及大部分有機溶劑（如DMSO），便于配制工作液。

• 儲存條件：

• 短期：4℃密封避光保存（避免反復凍融）。

• 長期：-20℃以下冰凍、干燥、避光保存（需分裝小份，減少解凍次數(shù)）。

結構式：

熒光特性與工作原理

• 熒光行為：

• 水溶液中基本無熒光，插入細胞膜后發(fā)射強熒光（橙紅色至黃色）。

• 熒光強度隨細胞膜電位變化而改變，可實時反映電位動態(tài)。

• 作用機制：

• 基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）技術，探針分子聚集在細胞膜上，受膜電位調(diào)控。

• 膜電位變化時，探針分子分布改變，導致熒光信號強度和分布變化。

核心應用場景

1. 神經(jīng)科學研究：

• 神經(jīng)元放電監(jiān)測：通過熒光強度變化，實時追蹤神經(jīng)元電活動，研究突觸傳遞過程。

• 囊泡循環(huán)研究：標記主動釋放神經(jīng)遞質(zhì)的神經(jīng)元，觀察突觸囊泡的動態(tài)循環(huán)。

2. 心血管科學研究：

• 心肌細胞電活動：檢測心肌細胞膜電位變化，研究心律失常等機制。

3. 免疫學研究：

• 免疫細胞活化：監(jiān)測免疫細胞膜電位變化，揭示細胞活化和遷移過程。

實驗操作要點

1. 工作液配制：

• 用DMSO配制儲備液（如5 mM），再用預熱緩沖液（如HBSS）稀釋至工作濃度（通常5-20 μM）。

2. 細胞標記流程：

• 懸浮細胞：離心收集細胞，PBS洗滌后加入染料工作液，室溫孵育5-30分鐘，再洗滌重懸。

• 貼壁細胞：培養(yǎng)于蓋玻片上，移除培養(yǎng)基后加入染料工作液，孵育后洗滌成像。

3. 注意事項：

• 避光操作：熒光探針對光敏感，所有步驟需在避光條件下進行。

• 避免反復凍融：分裝小份保存，減少解凍次數(shù)以維持探針穩(wěn)定性。

優(yōu)勢與局限性

• 優(yōu)勢：

• 高靈敏度：可檢測細胞膜電位微小變化（如毫伏級）。

• 快速響應：熒光信號變化與膜電位變化同步，適合動態(tài)監(jiān)測。

• 穩(wěn)定性好：長時間實驗中性能穩(wěn)定，減少實驗誤差。

• 局限性：

• 親脂性限制：雖能高效結合細胞膜，但可能影響某些膜蛋白功能。

• 光漂白風險：長時間光照可能導致熒光信號衰減，需優(yōu)化成像條件。

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