細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)需要的幾種試劑

細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)大量培養(yǎng)成為簡(jiǎn)單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞，這是克隆技術(shù)必須 的環(huán)節(jié)，而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。接下來(lái)了解在培養(yǎng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中常有的幾種試劑：

1、高糖DMEM溶液： 用新配制的三蒸水配制，高糖DMEM干粉（規(guī)格10×1L），溶入約總量的1/3的三蒸水，并用水洗凈包裝袋，在磁力攪拌器上攪拌30分鐘，加入NaHCO2 3.75克，補(bǔ)加水至最終量。用1N HCL調(diào)整PH為7.2，0.22μm濾膜抽濾除菌，分裝-20℃保存，使用時(shí)加10%的胎牛血清及雙抗溶液（最終濃度：青霉素100U/ml，鏈霉素 100μg/ml）

2、 胎牛血清： 使用前56℃水浴30分鐘滅活，無(wú)菌條件下分裝成10ml包裝，-20℃保存。用時(shí)以10%濃度注入培養(yǎng)液中。

3、 青霉素、鏈霉素雙抗溶液 青霉素100萬(wàn)單位及硫酸鏈霉素1g無(wú)菌條件下溶于消毒三蒸水10ml，分裝，-20℃保存。使用時(shí)每1000ml培養(yǎng)液加入青、鏈霉素混合液1ml，最終濃度為青霉素100單位/ml，鏈霉素100μg/ml。

4、磷酸鹽溶液（PBS）： NaCl 8g, KCl 0.4g, NaHPO4.H2O 1.15g KH2PO4 0.2g 分別溶于1000ml三蒸水中，調(diào)節(jié)PH值至7.4高壓蒸氣滅菌，分裝后4℃保存。

5、胰蛋白酶溶液： 用三蒸水制備成0.25%濃度，0.22μm濾膜抽濾除菌，4℃保存。

6、0.1%明膠溶液： 稱(chēng)取明膠粉劑0.1g于燒杯中，加入三蒸水100mL于50℃充分?jǐn)嚢柚疗鋡ang全溶解，0.22μm濾膜抽濾除菌，4℃保存。