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實(shí)了個驗(yàn)cck8試劑盒
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實(shí)了個驗(yàn)cck8試劑盒是一種高效、靈敏的細(xì)胞增殖和毒性檢測工具,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)研究和藥物篩選領(lǐng)域
產(chǎn)品介紹

實(shí)了個驗(yàn)cck8試劑盒

實(shí)了個驗(yàn)cck8試劑盒

CCK-8試劑盒 (Cell Counting Kit-8, 20T):高效便捷的細(xì)胞增殖與毒性檢測工具

1. 實(shí)了個驗(yàn)cck8試劑盒:產(chǎn)品概述

CCK-8試劑盒(Cell Counting Kit-8)是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測的試劑盒。該試劑盒基于WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺基苯基)-2H-四氮唑鈉鹽)化合物,在細(xì)胞存活的情況下,通過細(xì)胞脫氫酶作用將WST-8轉(zhuǎn)化為水溶性橙黃色甲臜(formazan)染料。生成的染料量與細(xì)胞數(shù)量成正比,因此可以通過測定吸光度來定量評估細(xì)胞增殖或毒性。

2. 實(shí)了個驗(yàn)cck8試劑盒:主要成分與功能

2.1 WST-8化合物

  • WST-8:WST-8是一種非放射性、無毒的四唑鹽,在活細(xì)胞中被脫氫酶還原生成橙黃色甲臜染料。由于生成的甲臜染料是水溶性的,避免了傳統(tǒng)MTT實(shí)驗(yàn)中使用有機(jī)溶劑的步驟,操作更加簡便。

2.2 電子載體

  • 電子載體:該試劑盒中的電子載體促進(jìn)了WST-8在細(xì)胞中電子轉(zhuǎn)移過程的高效進(jìn)行,從而確保了生成的甲臜量與細(xì)胞活性之間的線性關(guān)系。

3. 應(yīng)用領(lǐng)域

3.1 細(xì)胞增殖檢測

CCK-8試劑盒廣泛應(yīng)用于評估細(xì)胞增殖情況,適用于多種細(xì)胞類型,包括癌細(xì)胞、干細(xì)胞和原代細(xì)胞等。其操作簡單,靈敏度高,可快速獲取結(jié)果,特別適合于高通量篩選實(shí)驗(yàn)。

3.2 細(xì)胞毒性檢測

該試劑盒也是評估藥物、化學(xué)品和其他處理對細(xì)胞毒性影響的常用工具。通過測定藥物處理后細(xì)胞活性的變化,研究人員可以確定藥物的IC50值或其他毒性參數(shù)。

3.3 藥物篩選

在藥物研發(fā)過程中,CCK-8試劑盒被廣泛用于初步篩選藥物候選化合物。其高靈敏度和高通量特性使其成為藥物篩選和藥理學(xué)研究的理想選擇。

4. 使用方法

使用CCK-8試劑盒進(jìn)行細(xì)胞增殖或毒性檢測的步驟如下:

  1. 細(xì)胞培養(yǎng):將待測細(xì)胞接種在96孔板中,按實(shí)驗(yàn)需求設(shè)定細(xì)胞數(shù)量和培養(yǎng)時間。

  2. 添加試劑:根據(jù)說明書,將適量的CCK-8試劑添加到每個孔中(通常為10 µL/孔)。

  3. 孵育:將培養(yǎng)板放置在37°C、5% CO?的孵育箱中孵育1-4小時。孵育時間可根據(jù)細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行優(yōu)化。

  4. 測定吸光度:使用酶標(biāo)儀在450 nm波長處測定每個孔的吸光度值。吸光度值的大小與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。

  5. 數(shù)據(jù)分析:將測得的吸光度數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,計算細(xì)胞增殖率或細(xì)胞毒性指標(biāo)。

5. 產(chǎn)品優(yōu)勢

5.1 高靈敏度和廣泛適用性

CCK-8試劑盒具有高靈敏度,適合檢測低細(xì)胞數(shù)量的樣本。其對多種細(xì)胞類型的廣泛適用性使其成為細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的通用工具。

5.2 操作簡便,無毒性

與傳統(tǒng)的MTT試劑相比,CCK-8不需要額外的溶解步驟,生成的產(chǎn)物是水溶性的,實(shí)驗(yàn)過程無毒且更為環(huán)保。

5.3 快速獲取結(jié)果

該試劑盒操作簡便,通常在2-4小時內(nèi)即可獲得檢測結(jié)果,適合高通量實(shí)驗(yàn)和快速篩選應(yīng)用。

6. 注意事項(xiàng)

  • 孵育時間:孵育時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行優(yōu)化,以確保獲得線性范圍內(nèi)的吸光度讀數(shù)。

  • 保存條件:CCK-8試劑盒應(yīng)存放在4°C避光保存,避免反復(fù)凍融以保持試劑的活性。

  • 酶標(biāo)儀校準(zhǔn):在使用酶標(biāo)儀測定吸光度前,確保儀器已正確校準(zhǔn),以獲得準(zhǔn)確的測定結(jié)果。

7. 實(shí)驗(yàn)應(yīng)用實(shí)例

在抗癌藥物篩選實(shí)驗(yàn)中,研究人員使用CCK-8試劑盒評估了多種化合物對不同癌細(xì)胞系的抑制效果。通過測定吸光度變化,他們能夠快速確定各化合物的IC50值,從而篩選出具有潛力的候選藥物。

8. 總結(jié)

CCK-8試劑盒(20T)是一種高效、靈敏的細(xì)胞增殖和毒性檢測工具,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)研究和藥物篩選領(lǐng)域。其操作簡單、結(jié)果可靠,是實(shí)驗(yàn)室中的檢測手段。無論是在基礎(chǔ)研究還是應(yīng)用開發(fā)中,CCK-8試劑盒都能為實(shí)驗(yàn)提供準(zhǔn)確、快速的結(jié)果,為科學(xué)研究的推進(jìn)提供有力支持。




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