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真菌幾丁質(zhì)（Chitin）ELISA試劑盒

樣品收集、處理及保存方法；

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品；

1.酶標(biāo)儀（450nm）

2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒溫箱

操作注意事項；

1.   試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用。

2.   實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

3.   按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍，最終結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。

4.   嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

5.   所有液體組分使用前充分搖勻。

真菌幾丁質(zhì)（Chitin）ELISA試劑盒組成；

真菌幾丁質(zhì)（Chitin）ELISA試劑盒組成 96孔配制 48孔配制 備注 

微孔酶標(biāo)板 12孔*8條 12孔*4條 無 

標(biāo)準(zhǔn)品 0.3ml*6管 0.3ml*6管 無 

樣本稀釋液 6ml 3ml 無 

檢測行體-HRP 10ml 5ml 無 

20*洗滌緩沖液 25ml 15ml 按照說明書進(jìn)行稀釋 

底物A 6ml 3ml 無 

底物B 6ml 3ml 無 

終止液 6ml 3ml 無 

封板膜 2張 2張 無 

說明書 1份 1份 無 

自封袋 1個 1個 無 

注：標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S5）濃度依次為：0、2.5、5、10、20、40 ng/mL

試劑的準(zhǔn)備

 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

洗板方法

1.  手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。

  自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

操作步驟；

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.  樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的競爭抗原50μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

結(jié)果判斷；

 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

試劑盒性能

1. 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

2. 靈敏度：檢測濃度小于10μg/mL。

3. 檢測范圍：10-2400μg/mL。

4. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

5. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

6. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

7. 有效期：6個月

上海語純生物科技有限公司，是由具有資深生命科學(xué)、生物技術(shù)背景人員共同創(chuàng)辦的技術(shù)企業(yè)。公司專注于原代細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑產(chǎn)品，為高校、食品、醫(yī)藥、生物研究等領(lǐng)域提供相關(guān)技術(shù)支持和服務(wù)。

公司自成立以來通過不斷地科技創(chuàng)新，產(chǎn)品研發(fā)，已為客戶提供定制化細(xì)胞產(chǎn)品以及完整的細(xì)胞培養(yǎng)解決方案，通過積極地探索、研發(fā)、深化和豐富產(chǎn)品，目前基礎(chǔ)培養(yǎng)基產(chǎn)品種類多達(dá)200多種，細(xì)胞系300多種，原代細(xì)胞接近600種。我們始終以“發(fā)展科學(xué)技術(shù)，關(guān)愛公眾生命健康"為動力，通過技術(shù)創(chuàng)新，廣泛吸納高科技人才，不斷完善產(chǎn)品體系、豐富產(chǎn)品鏈，積極拓展市場，擴充應(yīng)用領(lǐng)域，，建立了具有市場競爭力的“語純"品牌。

注意事項

1、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套及口罩操作；

2、為保持本產(chǎn)品的優(yōu)良使用效果，請務(wù)必按照建議的儲存條件進(jìn)行保存；

3、本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用，不可用于臨床診斷或治療。

真菌幾丁質(zhì)（Chitin）ELISA試劑盒