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上海語純生物科技有限公司
初級會員·1年CC96302LBA4404感受態(tài)
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準- CC96302 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：10更新時間：2025-04-24 09:45:07
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CC96302 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號：CC96302
產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul
本產(chǎn)品僅供科學研究或進一步生產(chǎn)使用，不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹
LBA4404感受態(tài)
產(chǎn)品簡介
LBA4404菌株為 Ach5型背景，核基因中含有篩選標簽——利福平抗性基因 Rif，為了便于轉化操作，此
菌株攜帶一無自身轉運功能的章魚堿型 Ti 質粒 pAL4404，此質粒含有 vir 基因 (vir 基因是 T-DNA 插入
植物基因組必需的元件，pAL4404 質粒自身的 T-DNA 轉移功能被破壞，但可以幫助轉入的雙元載體 T
DNA 順利轉移)。 pAL4404 型 Ti 質粒含有篩選標簽：Strep，賦予 LBA4404 菌株鏈霉素抗性，適用于菸
草、番茄、煙草等植物的轉基因操作。本公司生產(chǎn)的 LBA4404 化學轉化感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，
pCAMBIA2301 質粒檢測轉化效率≥ 104 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
LBA4404
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：Ach5 (RifR) Ti pAL4404 (StrepR) Octopine
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
除章魚堿型 Ti 質粒 pAL4404 外，無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥104 cfu/μg DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，在手心融化成冰水混合物，置于冰水浴中；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，用手撥da管底混勻，依次于冰上靜置 10 分鐘、液氮 5 分
鐘（或干冰乙醇浴和-80℃冰凍）、37℃水浴 5 分鐘、冰浴 5 分鐘；
3.加入 900 μl 無抗生素的 YEB 液體培養(yǎng)基，于 28 ℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時；
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌，留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的 YEB 平板
上，倒置放于 28 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2-3 天當平板只含有 50 μg /ml Kan 時，28 ℃培養(yǎng) 48 h 即可；平板中同時
加入 50 μg/ml Kan，20 μg/ml Rif 時，需 28℃培養(yǎng) 60 h；如果使用的平板含有 50 μg/ml Rif 則需要 28 ℃
培養(yǎng) 72-90 h）。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；
3. 利福平濃度不應高于 25 μg/μl，利福平濃度過高不利于農(nóng)桿菌生長，會降低其生長速度和轉化效率。
4. 由于 Ti 質粒丟失的概率極低（可以忽略），所以相關抗性基因可以不用添加。
LBA4404感受態(tài)
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