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CC96308GV3101(pJlC SA-rep)感受態(tài)
參考價(jià): 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • CC96308 產(chǎn)品型號(hào)
  • 語(yǔ)純生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問(wèn)次數(shù):27更新時(shí)間:2025-04-24 10:08:01

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10 ×100ul/100×100ul
貨號(hào) CC96308 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥
GV3101(pJlC SA-rep)感受態(tài)
產(chǎn)品貨號(hào):CC96308
產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用,不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹

GV3101(pJlC SA-rep)感受態(tài)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介
GV3101(pJIC SA_Rep)菌株為 C58 型背景,核基因中含有篩選標(biāo)簽——利福平抗性基因 Rif,為了
便于轉(zhuǎn)化操作,此菌株攜帶一無(wú)自身轉(zhuǎn)運(yùn)功能的胭脂堿型 Ti 質(zhì)粒 pMP90 (pTiC58DT-DNA),此質(zhì)
粒含有 vir 基因 (vir 基因是 T-DNA 插入植物基因組必需的元件,pMP90 (pTiC58DT-DNA)質(zhì)粒自身
的 T-DNA 轉(zhuǎn)移功能被破壞,但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體 T-DNA 順利轉(zhuǎn)移)。pMP90 (pTiC58DT
DNA)型 Ti 質(zhì)粒含有篩選標(biāo)簽:Gent,賦予 GV3101 菌株慶大霉素抗性;在 GV3101 菌株中轉(zhuǎn)入
help 質(zhì)粒:pJIC SA_Rep 即為 GV3101(pJIC SA_Rep)菌株,可幫助 pgR106,pgR107,pGreen,pGs2
系列質(zhì)粒在農(nóng)桿菌中復(fù)制,同時(shí)賦予該菌株四環(huán)素(Tet)抗性。適用于擬南芥、煙草、玉米、土
豆等植物的轉(zhuǎn)基因操作。本公司生產(chǎn)的 GV3101(pJIC SA_Rep)化學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,
pGs2 (卡那霉素抗性)質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率≥ 10cfu/μg DNA
產(chǎn)品組成
組分
GV3101(pJIC SA_Rep)
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 ×100 μL
100 ×100 μL
定制
基因型:C58 (RifR) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) ( GentRNopaline(pJIC SA_Rep -TetR)
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
除胭脂堿型 Ti 質(zhì)粒 pMP90 和 pJIC SA_Rep 質(zhì)粒外,無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥10cfu/μg DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,在手心融化成冰水混合物,置于冰水浴中;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,用手撥da管底混勻,依次于冰上靜置 10 分鐘、液氮 
鐘(或干冰乙醇浴和-80℃冰凍)、37℃水浴 分鐘、冰浴 分鐘;
3.加入 900 μl 無(wú)抗生素的 YEB 液體培養(yǎng)基,于 28 ℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時(shí);
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌,留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的 YEB 平板
上,倒置放于 28 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2-3 天(當(dāng)平板只含有 50 μg/ml Kan 時(shí),28 ℃培養(yǎng) 48 h 即可;平板中同
時(shí)加入 50 μg/ml Kan,20 μg/ml Rif 時(shí),需 28 ℃培養(yǎng) 60 h;如果使用的平板含有 50 μg/ml Rif 則需要 28 ℃
培養(yǎng) 72-90 h)。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 利福平濃度不應(yīng)高于 25 μg/μl,過(guò)高的利福平濃度不利于農(nóng)桿菌生長(zhǎng),會(huì)降低其生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化效率。
4.因?yàn)?nbsp;Ti 質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略),所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時(shí)不考慮添加相應(yīng)抗生素。

GV3101(pJlC SA-rep)感受態(tài)

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