常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色液 凝膠染色 返回列表頁

諾博萊德 常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色液

常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色液   凝膠染色

產(chǎn)品簡介：

考馬斯亮藍(lán)染色液(Commassie Blue Staining Solution)是以考馬斯亮藍(lán)R250為染料可用于SDS-PAGE 或非變性PAGE等蛋白電泳膠的常規(guī)染色或Western轉(zhuǎn)膜后PAGE 膠上殘余蛋白的檢測。采用常規(guī)染色方法需至少1h，采用快速染色方法一般數(shù)分鐘即可。本染色液經(jīng)過改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性氣味的乙酸。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1、水平搖床或側(cè)擺搖床

2、蒸餾水

3、20%甘油水溶液

4、(可選)加熱裝置

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

操作步驟(僅供參考)：

(一)常規(guī)染色脫色方法

1、PAGE 電泳結(jié)束后取凝膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中，確保染色液可以充分覆蓋凝膠。

2、置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動，室溫染色1 小時或更長時間。具體的染色時間取決于凝膠的厚度和染色時的溫度。凝膠較厚，溫度較低，則染色時間宜適當(dāng)延長。凝膠較薄，溫度較高，則染色時間可以適當(dāng)縮短。通常染色至凝膠的顏色和染色液的顏色非常接近，在染色液中幾乎看不清凝膠時，可以認(rèn)為已染色充分。染色2～4個小時或更長時間不會對最終的染色效果產(chǎn)生負(fù)面影響。

3、倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用2～3 次。

4、加入適量脫色液，確保脫色液可以充分覆蓋凝膠。NobleRyder推薦脫色液的配方是：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸餾水。

5、置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動，室溫脫色4～24h。期間更換脫色液2～4 次，直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去，并且蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。通常蛋白條帶在脫色1～2h 后即可出現(xiàn)。

6、完成脫色后把凝膠保存在水中，用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會發(fā)生溶漲。如需避免溶漲，可以把膠保存在含20%甘油水溶液中，長期保存可以制備干膠。

(二)快速染色脫色方法

1、PAGE 電泳結(jié)束后取膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中，微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱。通常對于膠濃度大于10％的膠比較堅韌，在發(fā)生煮沸時不易破損；對于膠濃度小于10%的膠，宜盡量避免煮沸，以免出現(xiàn)膠碎裂的情況。

2、隨后在染色液溫度較高的情況下，在室溫?fù)u床上搖動5～10min。

3、倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用2～3 次。

4、加入適量脫色液，確保染色液可以充分覆蓋凝膠。NobleRyder推薦脫色液的配方是：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸餾水。

5、微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱。

6、 隨后在脫色液溫度較高的情況下，在搖床上搖動5～10min。此時通?？梢杂^察到比較清楚的蛋白條帶。

7、更換新鮮的脫色液，重復(fù)步驟5 和步驟6，直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去，蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。

8、 完成脫色后，把凝膠保存在水中，用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會發(fā)生溶漲。如需避免溶漲，可以把膠保存在含20%甘油水溶液中，長期保存可以制備干膠。

注意事項：

1、染色時，如果把凝膠和染色液一起放置在微波爐中適當(dāng)加熱，可以大大加快染色速度。但加熱時宜盡量避免沸騰，以免出現(xiàn)因暴沸而導(dǎo)致的凝膠碎裂。

2、脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙，可以使部分染料吸附在吸水紙上，加快脫色。脫色時間過長也會導(dǎo)致蛋白條帶的顏色變淺。

3、如果希望染色的背景更低，希望獲得更加清晰的蛋白條帶，可以加入適量的室溫蒸餾水進(jìn)行洗滌。通過蒸餾水洗滌可以進(jìn)一步降低背景。在4℃蒸餾水中浸泡過夜可以獲得背景更低，條帶更清晰的條帶。在次日對4℃蒸餾水浸泡過夜的已經(jīng)進(jìn)行了染色的凝膠再同前一天一樣進(jìn)行染色和洗滌可以進(jìn)一步改善染色效果，獲得更好的考染蛋白條帶。

4、常規(guī)染色脫色方法耗時較長，但檢測靈敏度更高，染色效果更加穩(wěn)定?？焖偃旧撋椒ㄍǔz測靈敏度略低，并且在微波爐加熱的過程中有時會出現(xiàn)暴沸導(dǎo)致凝膠碎裂的情況，需特別注意。另外微波爐加熱導(dǎo)致的高溫會引起染色液和脫色液中的乙酸的揮發(fā)，。

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期：12個月有效。

常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色液   凝膠染色

產(chǎn)品訂購信息：

P2818 常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色液 100ml / 500ml