Taqman一步法熒光定量PCR試劑盒 核酸檢測(cè) 返回列表頁(yè)

諾博萊德  TaqMan One Step RT-qPCR Kit

Taqman一步法熒光定量PCR試劑盒 核酸檢測(cè)

產(chǎn)品貨號(hào)：SR9998

產(chǎn)品名稱：TaqMan One Step RT-qPCR Kit

產(chǎn)品別名：Taqman一步法熒光定量PCR試劑盒，一步法實(shí)時(shí)熒光定量試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：50T/200T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

儲(chǔ)存條件：Store at -20℃，1 year.

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyderSR9998  TaqMan One Step RT-qPCR Kit本產(chǎn)品是采用探針?lè)ǎ?/span>TaqMan，Molecular Beacon等）進(jìn)行一步法Real-Time RTqPCR的專用試劑盒。使用本產(chǎn)品進(jìn)行RealTime RT-qPCR反應(yīng)時(shí)，逆轉(zhuǎn)錄和定量PCR在同一反應(yīng)體系中進(jìn)行，反應(yīng)過(guò)程中無(wú)需添加試劑，無(wú)需打開(kāi)管蓋，避免了污染的同時(shí)提高了實(shí)驗(yàn)效率。本產(chǎn)品的檢測(cè)靈敏度高，熒光信號(hào)強(qiáng)，信噪比高，非常適合于RNA病毒等微量RNA的檢測(cè)。其所包含的特殊緩沖系統(tǒng)能使逆轉(zhuǎn)錄酶與DNA聚合酶同時(shí)發(fā)揮最大功效，提高反應(yīng)效率。使用本產(chǎn)品可以得到更寬廣的線性范圍，對(duì)目的基因定量更準(zhǔn)確，重復(fù)性好，可信度高。

試劑原理：

本產(chǎn)品利用化學(xué)修飾熱啟動(dòng)酶HSTaqDNApolymerase進(jìn)行qPCR擴(kuò)增反應(yīng)，通過(guò)擴(kuò)增產(chǎn)物嵌合SYBRGreen? 而激發(fā)的熒光信號(hào)強(qiáng)度進(jìn)行檢測(cè)。

1、PCR

 PCR 法是以微量DNA進(jìn)行目的片段擴(kuò)增的方法。通過(guò)DNA鏈的熱變性、引物退火、DNA聚合酶作用下引物的延伸三個(gè)步驟循環(huán)往復(fù)，可在短時(shí)間內(nèi)擴(kuò)增大量DNA片段。

2、熒光檢出

SYBR Green I 是一種結(jié)合于小溝中的雙鏈DNA結(jié)合染料。與雙鏈DNA結(jié)合后，其熒光大大增強(qiáng)，最大吸收波長(zhǎng)約為497nm，發(fā)射波長(zhǎng)最大約為520nm。

SYBR Green I 可以與所有的雙鏈DNA相結(jié)合，無(wú)需使用探針，即可實(shí)現(xiàn)檢測(cè)，通用性好，且靈敏度很高。但是，由于SYBRGreenI與所有的雙鏈DNA相結(jié)合，因此由引物二聚體、單鏈二級(jí)結(jié)構(gòu)以及錯(cuò)誤的擴(kuò)增產(chǎn)物引起的假陽(yáng)性會(huì)影響定量的精確性。在定量?jī)x器檢測(cè)過(guò)程中，可以通過(guò)測(cè)量升高溫度后熒光的變化，由解鏈曲線來(lái)分析產(chǎn)物的均一性，從而區(qū)分產(chǎn)物的融解峰溫度而區(qū)分特異與非特異的產(chǎn)物。

注意事項(xiàng)：

1. 2×SYBRGreen PCRmix 經(jīng)過(guò)特殊配制，采用化學(xué)修飾熱啟動(dòng)酶，具有更高特異性；

2. 對(duì)于退火溫度較低的引物或超過(guò)200bp長(zhǎng)片段擴(kuò)增建議采用三步法；

3. 擴(kuò)增前后要使用專用的區(qū)域和移液器，戴手套操作并經(jīng)常更換，PCR反應(yīng)完成后切勿打開(kāi)反應(yīng)管。以最大限度的減少PCR產(chǎn)物對(duì)樣品的污染。

Taqman一步法熒光定量PCR試劑盒 核酸檢測(cè)

產(chǎn)品訂購(gòu)信息

SR9998  TaqMan One Step RT-qPCR Kit  50T/200T