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諾博萊德 氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量檢測(cè)試劑盒Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit

氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量檢測(cè)試劑盒 細(xì)胞

產(chǎn)品貨號(hào)：BC9963

產(chǎn)品名稱(chēng)：氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量檢測(cè)試劑盒Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit

英文名稱(chēng)：Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100T/96S

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品別名：氧化型gu胱甘肽含量測(cè)定試劑盒/GSSG Kit 氧化型gu胱甘肽（GSSG）含量測(cè)定試劑盒/氧化型gu胱甘肽（GSSG）含量測(cè)試盒

檢測(cè)方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

儲(chǔ)存條件：Store at 2-8℃，6 months

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyderBC9963 氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量檢測(cè)試劑盒Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit是gu胱甘肽(GSH)的化形式，又稱(chēng)為二硫代gu甘肽，是兩分子的gu胱甘肽氧化而成。GSSG 會(huì)被gu胱甘肽還原酶還原成GSH，因此機(jī)體中大多數(shù)是以還原型形式存在。測(cè)定細(xì)胞內(nèi)GSH 和GSSG含量以及GSHGSSG比值，能夠很好地反映細(xì)胞新處的氧化還原狀態(tài)。本試劑盒利用gu胱甘肽能和5.5-二硫代-雙-(2-硝基苯甲酸)(5.5'-dithiobis-2-nitrobenoic acid，DTNB)反應(yīng)產(chǎn)生 2-硝基-5-巰基苯甲酸，2-硝基-5-巰基苯甲酸在波長(zhǎng) 412nm 處具有最大光吸收的特點(diǎn)，通過(guò) 2-乙烯吡啶抑制樣本中原有的還原型gu胱甘肽，然后利用gu胱甘肽還原酶將GSSG還原為GSH，借此測(cè)定氧化型gu胱甘肽的含量。

技術(shù)指標(biāo):

*低檢出限:3.2llHg/mL

線性范圍:3.9-125 ug/mL

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、分析天平、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、勻漿器/研缽/細(xì)胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。

操作步驟:

一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn))

1、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL 試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿(勻漿器/研缽提前放冰上預(yù)冷)。12000g，4℃離心10min，取上清液放置于4℃待測(cè)。若暫時(shí)不能完成測(cè)試可放于-80℃C保存(可保存3天)。

2、細(xì)菌、細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(106個(gè)):試劑一體積(mL)為5~10:1的比例(建議5百萬(wàn)細(xì)胞加入1mL 試劑一)，反復(fù)凍融2-3次(可在液氮中凍結(jié)、37℃℃水浴中溶解)或者冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率200w，超聲 3s,間隔10s，重復(fù)30次)，12000g，4C離心10分鐘，取上清置于冰上待測(cè)。若暫時(shí)不能完成測(cè)試可放于-80℃保存(可保存3天)。

3、血液處理

血漿:將收集的抗凝血于4℃，600g離心10分鐘，吸取上層血漿到另一支試管中，加入等體積的試劑一，沸水浴 5min(纏封口膜，防止爆蓋)。之后I2000g，4℃離心 10 分鐘，將上清移入新的試管中放置于 4℃待測(cè)，若暫時(shí)不能完成測(cè)試可放于-80C保存(可保存3天)。

血細(xì)胞:將收集的抗凝血于4℃，600g離心10分鏟，棄去上層血漿用3倍體積的PBS 清洗3次(用PBS重懸血細(xì)胞，600g離心 10分鐘)，加入等體積試劑一，沸水浴5min(纏封口膜，防止爆蓋)。之后12000g，4℃離心10分鐘，吸取上清放于4℃待測(cè)，若暫時(shí)不能完成測(cè)試可放于-80℃保存(可保存3天)。

注意事項(xiàng):

1.若不確定樣本中 GSSG 含量的高低，可稀釋幾個(gè)梯度后再進(jìn)行測(cè)量。

2. 如果測(cè)定吸光值超過(guò)線性范圍吸光值，可以增加樣云量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。

3.因?yàn)樵噭┮恢泻械鞍踪|(zhì)沉淀劑，因此上清液不能月于蛋白濃度測(cè)定。如測(cè)定蛋白含量，需另取組織。

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BC9963 氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量檢測(cè)試劑盒Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit  100T/96S