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諾博萊德 吲哚乙酸氧化酶活性檢測試劑盒 Indoleacetic acid oxidase Activity Assay Kit

吲哚乙酸氧化酶活性檢測試劑盒 光合作用

產(chǎn)品貨號：BC2983

產(chǎn)品名稱：吲哚乙酸氧化酶活性檢測試劑盒 Indoleacetic acid oxidase Activity Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100T/48S

產(chǎn)品簡介：

自備試劑：該試劑盒實驗過程中需自備試劑，詳情見網(wǎng)站說明書

中文名稱：吲哚乙酸氧化酶活性檢測試劑盒

英文名稱：Indoleacetic acid oxidase Activity Assay Kit

規(guī)格：100T/48S

檢測方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

儲存條件：Store at -20℃，6 months

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

產(chǎn)品說明：

吲哚乙酸(IAA)在吲哚乙酸氧化酶的作用下，被氧化破壞失去活性。IAA氧化酶能調(diào)節(jié)植物體內(nèi)吲哚乙酸的的水平，從而影響植物的生長。

IAA在無機酸條件下與FeCl3作用生成紅色產(chǎn)物，在530nm下有最大吸收峰。酶活力的大小可用消耗IAA的速率表示。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、低溫離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器/超聲破碎儀、乙醇(>98%，AR)、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理(可適當調(diào)整待測樣本量)

1、組織：稱取約0.1g組織，加入ImL提取液進行冰浴勻漿。12000g4℃離心15min，取上清，置冰上待測。

2、細胞或細菌樣本的制備：先收集細胞或細菌樣本到離心管內(nèi)，棄上清，按照每500萬細胞或細菌加入1mL提取液，超聲波破碎細菌或細胞(功率200W，超聲3s，間隔10s，重復30次)。12000g，4℃離心15min，取上清，置冰上待測。

二、測定步驟

1、可見分光光度計/酶標儀預熱30min，波長調(diào)至530nm，分光光度計蒸餾水調(diào)零。

2、標準液的稀釋：將標準溶液用蒸餾水稀釋為0.4、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125μmol/mL的標準液。

三、吲哚乙酸氧化酶酶活計算

1、標準曲線的繪制：

以標準液的濃度(μmol/mL)為x軸，對應的△A標準為y軸繪制標準曲線，得到標準方程y=kx+b，將ΔA測定帶入方程中計算得到樣本濃度(x，μmol/mL)

2、吲哚乙酸氧化酶活力計算：

Solarbio

(1)按蛋白濃度計算：

單位的定義：每mg組織蛋白在反應體系中每分鐘消耗1nmolIAA的酶量定義為一個酶活性單位。

IAA氧化酶酶活(U/mg prot)=xxV酶促x1000+(V樣xCpr)+T=333xx+Cpr

(2)按樣本質(zhì)量計算：

單位的定義：每g組織在反應體系中每分鐘消耗1nmolIAA的酶量定義為一個酶活性單位。

IAA氧化酶酶活(U/g質(zhì)量)=xxV酶促x1000+(W+V提取xV樣)+T=333xx÷W

(3)按細胞或細菌數(shù)量計算：

單位的定義：每104個細胞或細菌在反應體系中每分鐘消耗lnmolIAA的酶量定義為一個酶活性單位。

IAA氧化酶酶活(U/104cell)=xxV酶促x1000+(N÷V提取xV樣)+T=333×x÷N

V酶促酶促反應總體積，0.08mL：1000：單位換算系數(shù)，1μmol=1000nmol;V樣加入的樣本體積，0.008mL：Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL;W：樣本質(zhì)量，g;V提?。禾崛∫后w積，1mL;N：細胞數(shù)量，以萬計;T：反應時間，30min。

吲哚乙酸氧化酶活性檢測試劑盒 光合作用

產(chǎn)品訂購信息：

BC2983吲哚乙酸氧化酶活性檢測試劑盒 Indoleacetic acid oxidase Activity Assay Kit 100T/48S