大腸桿菌蛋白表達系統(tǒng)是目前應用廣泛，也是經(jīng)濟實惠的蛋白表達系統(tǒng)。E. coli具有遺傳背景清楚、細胞增殖快、表達量高、穩(wěn)定性好和抗污染能力強等特點，適用于多種屬蛋白的表達，尤其對小分子蛋白的生產(chǎn)具有極大的優(yōu)勢，但也存在一些問題，如易形成包涵體和含有內(nèi)毒素等。義翹神州提供從密碼子優(yōu)化到重組蛋白表達/純化的一站式服務以及內(nèi)毒素去除等附加服務，以滿足不同的定制需求。我們擁有豐富的E. coli 可溶性蛋白表達/純化及蛋白復性經(jīng)驗，擁有多種E. coli細胞株和表達載體，可為客戶提供優(yōu)質(zhì)的原核蛋白表達服務。

E. coli 蛋白表達服務內(nèi)容

• 附加服務
為滿足客戶的特定需求，義翹神州還提供更加廣泛的服務，包括：內(nèi)毒素去除服務、標簽去除服務、蛋白標記服務。

原核蛋白表達服務流程

大腸桿菌蛋白表達服務案例

案例 #1: 在大腸桿菌（E. coli）中表達可溶性無標簽蛋白

三步法進行蛋白純化（基于蛋白質(zhì)的等電點、疏水性和分子量）

1st step:                     Protein Purification by SP-FF	2nd step:                     Protein Purification by HIC-FF	3rd Step:                     Protein Purification by SEC

• 案例 #2: 在大腸桿菌（E. coli）中表達目的蛋白

義翹神州按照客戶要求，采用原核表達系統(tǒng)進行目的蛋白的表達和純化，成功交付了純化蛋白和質(zhì)量檢驗報告 (CoA)。相關(guān)的SEC-HPLC、SDS-PAGE和細胞活性分析結(jié)果如下所示。

SEC-HPLC>98.5%	Reducing SDS-PAGE>95%	Cell bioactivity: EC50=17pg/mL

原核蛋白表達的常見問題解答

• 什么情況下建議選擇大腸桿菌表達系統(tǒng)？
  大腸桿菌表達系統(tǒng)是常用的蛋白表達系統(tǒng)，優(yōu)勢包括遺傳背景清晰、成本低、表達量高、易于放大和時間短等，缺點是容易形成包涵體和無法進行翻譯后修飾。該系統(tǒng)適用于表達原核來源的蛋白或不需要翻譯后修飾的真核來源蛋白，特別是小分子蛋白。如果您感興趣的蛋白符合這種情況，建議選擇原核表達系統(tǒng)。

• 在大腸桿菌蛋白表達系統(tǒng)中，義翹神州能解折疊不溶蛋白嗎？
  是的。我們的科學家在蛋白質(zhì)解折疊方面擁有豐富的經(jīng)驗。選擇哪種蛋白解折疊策略需要根據(jù)蛋白質(zhì)的序列和結(jié)構(gòu)特性來確定。

• 義翹神州提供標簽去除服務嗎？
  是的。我們構(gòu)建載體時可以在標簽蛋白和目的蛋白之間加上蛋白酶的酶切位點，這樣純化后就可以利用蛋白酶去除標簽，得到完整的目的蛋白。蛋白酶的切割效率受目的蛋白的影響，具體由實驗結(jié)果而定。

• 密碼子優(yōu)化可以提高蛋白表達水平嗎？
  一般來說，經(jīng)過密碼子優(yōu)化后，蛋白的表達水平會變高。 因此，我們也提供密碼子優(yōu)化服務。