酶蛋白及檢測(cè)方法開(kāi)發(fā)服務(wù)

激酶是一類能夠?qū)⒘姿峄鶊F(tuán)從ATP轉(zhuǎn)移到另一種分子上酶，包括蛋白激酶、脂質(zhì)激酶和碳水化合物激酶等。其中，蛋白激酶是細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中扮演關(guān)鍵角色，調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化、代謝、生存和遷移等過(guò)程。激酶信號(hào)通路的異常與癌癥、心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病和代謝紊亂等多種人類病理狀態(tài)有關(guān)。因此，深入研究激酶對(duì)于揭示這些疾病的發(fā)病機(jī)制、開(kāi)發(fā)新療法和設(shè)計(jì)靶向藥物至關(guān)重要。

SignalChem Biotech（義翹神州全資子公司）的活性激酶產(chǎn)品線在全-球范圍內(nèi)的覆蓋率處于行業(yè)領(lǐng)-先地位，可以提供廣泛的高純度、高活性的重組蛋白激酶和脂質(zhì)激酶，以支持您的學(xué)術(shù)研究和藥物發(fā)現(xiàn)工作。我們建立了嚴(yán)格的質(zhì)量控制測(cè)試，以滿足激酶研究人員對(duì)項(xiàng)目一致性和可靠性的要求。此外，SignalChem還可以提供酶蛋白檢測(cè)方法的開(kāi)發(fā)服務(wù)，憑借在酶蛋白研究、開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)方面超過(guò)20年的專業(yè)知識(shí)和經(jīng)驗(yàn)積累，我們可根據(jù)您的個(gè)性化或高難度項(xiàng)目需求精準(zhǔn)定制，提供解決方案。

我們的服務(wù)包括：
• 高生物活性的酶蛋白生產(chǎn)，可提供全長(zhǎng)或片段蛋白，以及帶標(biāo)簽和無(wú)標(biāo)簽的形式；
• 為靶蛋白定制開(kāi)發(fā)檢測(cè)方法；
• 通過(guò)與已知的抑制劑對(duì)比，對(duì)創(chuàng)建的檢測(cè)方法進(jìn)行全面驗(yàn)證；
• 確定靶蛋白的動(dòng)力學(xué)參數(shù)。

服務(wù)優(yōu)勢(shì)

服務(wù)流程

服務(wù)內(nèi)容

定制酶蛋白開(kāi)發(fā)策略

周期：快4周，平均6-8周

特色檢測(cè)平臺(tái)

周期：具體時(shí)間取決于待檢測(cè)蛋白和檢測(cè)平臺(tái)。預(yù)計(jì)現(xiàn)有檢測(cè)平臺(tái)需要1-2周，開(kāi)發(fā)新的檢測(cè)平臺(tái)需要4周以上。

服務(wù)案例

酶蛋白及檢測(cè)方法開(kāi)發(fā)服務(wù)常見(jiàn)問(wèn)題解答

除HIS和GST外，可否使用其他蛋白標(biāo)簽？

我們可以定制其他標(biāo)簽（如FLAG和Fc）融合蛋白。

可否定制無(wú)標(biāo)簽蛋白？

我們可以根據(jù)您的需求定制無(wú)標(biāo)簽蛋白。

為什么SignalChem的重組蛋白有些在大腸桿菌細(xì)胞中表達(dá)，而有些則在Sf9昆蟲(chóng)細(xì)胞中表達(dá)？

需依據(jù)目的蛋白的功能和應(yīng)用選擇表達(dá)系統(tǒng)。昆蟲(chóng)細(xì)胞（如Sf9）提供類似哺乳動(dòng)物細(xì)胞的翻譯后修飾，表達(dá)的重組蛋白在結(jié)構(gòu)上更接近天然蛋白、具有生物活性。而大腸桿菌缺乏真核表達(dá)系統(tǒng)對(duì)蛋白進(jìn)行的翻譯后修飾加工，表達(dá)產(chǎn)物可能僅具有低限度的基礎(chǔ)活性、往往不及Sf9昆蟲(chóng)細(xì)胞生產(chǎn)的重組蛋白的活性。

SignalChem的酶蛋白適合用于晶體學(xué)研究嗎？

SignalChem的活性酶蛋白經(jīng)過(guò)了體外活性驗(yàn)證，酶蛋白開(kāi)發(fā)服務(wù)可高度定制化，例如提供額外的純化步驟、緩沖液置換、和標(biāo)簽修飾等，滿足蛋白晶體學(xué)研究等其他應(yīng)用的要求。

請(qǐng)問(wèn)激酶優(yōu)化反應(yīng)時(shí)怎么選擇底物濃度？與Km有什么關(guān)系？

通常我們所說(shuō)的激酶反應(yīng)的底物指的是磷酸基團(tuán)的受體多肽。由于大多數(shù)的激酶抑制劑化合物和多肽底物對(duì)與激酶的結(jié)合并無(wú)競(jìng)爭(zhēng)性，因此抑制劑的抑制效力并不會(huì)受到底物濃度的顯著影響。在這種情況下，合適的底物濃度應(yīng)該設(shè)置為遠(yuǎn)高于底物的Km值，從而可以確保反應(yīng)動(dòng)力學(xué)不會(huì)因?yàn)榈孜锏南亩l(fā)生變化。一個(gè)相對(duì)簡(jiǎn)單的確定合適底物濃度的方法是，在反應(yīng)終止時(shí)，底物濃度的降低不應(yīng)超過(guò)初始濃度的20%。

如何計(jì)算蛋白質(zhì)的濃度？

我們每種蛋白產(chǎn)品的濃度都是通過(guò)在 SDS-PAGE 凝膠上使用牛血清白蛋白（BSA）或牛γ球蛋白（BGG）的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行滴定計(jì)算得出的。

是否能使用你們的蛋白質(zhì)作為ELISA檢測(cè)的校準(zhǔn)物？

SignalChem的蛋白可以用作校準(zhǔn)物。需要注意的是，如果您使用GST標(biāo)記的蛋白質(zhì)，請(qǐng)確保使用GST蛋白作為對(duì)照。