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BH3427 LLC+GFP 小鼠肺癌細(xì)胞綠色熒光標(biāo)記

具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
  • 品牌 語純生物
  • 型號 BH3427
  • 產(chǎn)地
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時間 2025/3/18 14:40:34
  • 訪問次數(shù) 7

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上海語純生物科技有限公司,是由具有資深生命科學(xué)、生物技術(shù)背景人員共同創(chuàng)辦的技術(shù)企業(yè)。公司專注于原代細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑產(chǎn)品,為高校、食品、醫(yī)藥、生物研究等領(lǐng)域提供相關(guān)技術(shù)支持和服務(wù)。

公司自成立以來通過不斷地科技創(chuàng)新,產(chǎn)品研發(fā),已為客戶提供定制化細(xì)胞產(chǎn)品以及完整的細(xì)胞培養(yǎng)解決方案,通過積極地探索、研發(fā)、深化和豐富產(chǎn)品,目前基礎(chǔ)培養(yǎng)基產(chǎn)品種類多達200多種,細(xì)胞系300多種,原代細(xì)胞接近600。我們始終以發(fā)展科學(xué)技術(shù),關(guān)愛公眾生命健康為動力,通過技術(shù)創(chuàng)新,廣泛吸納高科技人才,不斷完善產(chǎn)品體系、豐富產(chǎn)品鏈,積極拓展市場,擴充應(yīng)用領(lǐng)域。




細(xì)胞技術(shù)研發(fā)和應(yīng)用,技術(shù)服務(wù)

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1x106
貨號 BH3427 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

LLC+GFP 小鼠肺癌細(xì)胞綠色熒光標(biāo)記

細(xì)胞描述

Lewis肺癌是一種從C57BL小鼠的肺中建立的細(xì)胞系,該細(xì)胞帶有原發(fā)性Lewis肺癌的植入所致的腫瘤,被廣泛用作轉(zhuǎn)移的模型,可用于研究癌癥化學(xué)治療劑的機制。

該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶GFP基因。

細(xì)胞特性

1) 來源:小鼠肺癌組織

2)形態(tài):半貼壁生長,混合形態(tài),有上皮細(xì)胞樣,松散貼壁或懸浮有梭形、圓形等細(xì)胞形態(tài) 。

3)含量:>1x106  細(xì)胞數(shù)

4)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)用途:僅供科研使用。

細(xì)胞篩選

該細(xì)胞為已經(jīng)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染GFP的細(xì)胞,隨細(xì)胞傳代次數(shù)的增加,其GFP熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。建議收到細(xì)胞后至少傳3代,凍存留種后再進行篩選。

初次進行細(xì)胞篩選時,建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的培養(yǎng)基維持培養(yǎng),若無細(xì)胞漂浮或者漂浮較少,即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的培養(yǎng)基繼續(xù)篩選,以此類推,至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過程中,漂浮細(xì)胞大于60%,則停止篩選,換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng),至細(xì)胞密度約80%,可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進行篩選。當(dāng)加入5ug/ml嘌呤霉素時細(xì)胞正常增殖,可停止篩選,用不含藥培養(yǎng)基正常培養(yǎng)。

運輸和保存

干冰運輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

11mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

細(xì)胞接收后的處理

1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在45X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)半貼細(xì)胞和貼壁不牢(懸浮)細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱中約2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的情況,若細(xì)胞密度在60%以下,客戶需收集T25瓶中的懸浮細(xì)胞離心后用培養(yǎng)基重懸后打回到原培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),若細(xì)胞生長70%-90%對細(xì)胞進行傳代,傳代時需要收集培養(yǎng)基中懸浮的細(xì)胞離心后回收。

4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶12傳代 。       

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備

1)準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%

注意:此細(xì)胞貼壁不牢,生長前期懸浮細(xì)胞較多,后期貼壁細(xì)胞較多,建議傳代和換液時回收培養(yǎng)基中懸浮的細(xì)胞。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細(xì)胞處理

1)凍存細(xì)胞的復(fù)蘇

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達70%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

 LLC+GFP 小鼠肺癌細(xì)胞綠色熒光標(biāo)記

LLC+GFP 小鼠肺癌細(xì)胞綠色熒光標(biāo)記





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