匯智和源生物技術(shù)(蘇州)有限公司
原代肝細(xì)胞的分離、培養(yǎng)與應(yīng)用
檢測樣品:原代肝細(xì)胞 肝細(xì)胞 肝原代細(xì)胞
檢測項(xiàng)目:原代肝細(xì)胞 肝細(xì)胞 肝原代細(xì)胞
方案概述:肝臟是藥物代謝的重要器官,體外代謝模型多以肝臟為基礎(chǔ)。常用的體外模型有肝微粒體、肝S9、肝胞質(zhì)液、原代肝細(xì)胞、肝組織切片、重組人代謝酶等。其中,原代肝細(xì)胞因具有較好的體外試驗(yàn)重現(xiàn)性,基本維持了肝臟的代謝功能,特別是較好的保留了與體內(nèi)一致的酶水平,成為了體外藥物試驗(yàn)的“金標(biāo)準(zhǔn)”,廣泛應(yīng)用于藥物代謝與毒理學(xué)研究中。
肝臟是藥物代謝的重要器官,體外代謝模型多以肝臟為基礎(chǔ)。常用的體外模型有肝微粒體、肝S9、肝胞質(zhì)液、原代肝細(xì)胞、肝組織切片、重組人代謝酶等。其中,原代肝細(xì)胞因具有較好的體外試驗(yàn)重現(xiàn)性,基本維持了肝臟的代謝功能,特別是較好的保留了與體內(nèi)一致的酶水平,成為了體外藥物試驗(yàn)的“金標(biāo)準(zhǔn)”,廣泛應(yīng)用于藥物代謝與毒理學(xué)研究中。
1 原代肝細(xì)胞及其應(yīng)用
原代肝細(xì)胞(Primary hepatocytes)是指從動(dòng)物肝臟取出后立即培養(yǎng)的肝細(xì)胞。原代肝細(xì)胞作為一種體外模型,具有其它體外模型不可替代的優(yōu)點(diǎn):
①與體內(nèi)環(huán)境保持一致,酶量和輔助因子水平都是正常的生理濃度,可以在接近生理狀態(tài)的的情況下研究藥物的代謝和毒性;
②較好保留和維持了肝細(xì)胞的完整形態(tài)和肝細(xì)胞體外代謝活性,真實(shí)反應(yīng)了體內(nèi)的代謝情況。
隨著技術(shù)水平的不斷提高,原代培養(yǎng)的動(dòng)物和人肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究:
①探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動(dòng)力學(xué)的研究;
②評價(jià)藥物和外源性物質(zhì)對肝臟中細(xì)胞色素P450酶誘導(dǎo)作用并探討其誘導(dǎo)機(jī)制;
③預(yù)測和解釋藥物與藥物之間的相互作用;
④研究藥物的細(xì)胞毒性等。
2 原代肝細(xì)胞分離
肝細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞,具有豐富的酶系及多種特異性功能,被廣泛用于生物化學(xué)、實(shí)驗(yàn)性肝損傷、藥代動(dòng)力學(xué)、 毒理學(xué)和致癌作用等研究。然而,分離并培養(yǎng)出高活性的原代肝細(xì)胞成為了關(guān)鍵步驟,分離的原代肝細(xì)胞在體外是否能夠存活
目前,原代肝細(xì)胞分離常用的方法有直接剪切法、組織塊消化法和兩步膠原酶灌流法等。其中,兩步膠原酶灌流法因其對肝細(xì)胞損傷作用較小,在膠原酶消化細(xì)胞前使用了螯合劑,提高了肝細(xì)胞的產(chǎn)量和活力,分離的肝細(xì)胞數(shù)量多且活力好,成為了分離原代肝細(xì)胞的經(jīng)典方法。
兩步膠原酶灌注法先使用無鈣灌流液灌注,無鈣灌流液作為預(yù)灌液,可以將肝臟內(nèi)的殘留血液灌注出,除去或者減少細(xì)胞間的鈣離子,以減少細(xì)胞間的粘著力。經(jīng)無鈣灌流液灌注后再使用含酶灌流液進(jìn)行灌注把組織中的細(xì)胞釋放出來。膠原酶在消化肝的同時(shí)解除了細(xì)胞間接觸抑制或活化了潛在的蛋白激酶、生長因子或受體,使肝細(xì)胞能逐漸適應(yīng)消化分離過程中所發(fā)生的細(xì)胞、外環(huán)境及細(xì)胞的各種改變,這些改變對離體肝細(xì)胞修復(fù)、生長及功能有重要的促進(jìn)作用,有利于肝細(xì)胞的培養(yǎng)。
3 IPHASE原代肝細(xì)胞產(chǎn)品
IPHASE/匯智和源憑借多年的技術(shù)能力和技術(shù)經(jīng)驗(yàn)的積累,不斷摸索和優(yōu)化原代肝細(xì)胞分離過程,現(xiàn)已形成猴、犬、大鼠、小鼠等原代肝細(xì)胞產(chǎn)品。
4 IPHASE原代肝細(xì)胞優(yōu)勢
l 安全性
IPHASE/匯智和源分離原代肝細(xì)胞所用動(dòng)物均經(jīng)過傳染源檢測,使用安全、更放心。
l 純度高
IPHASE/匯智和源生產(chǎn)的原代肝細(xì)胞經(jīng)分離純化后純度高,狀態(tài)好。
l 活性好
IPHASE/匯智和源生產(chǎn)的原代肝細(xì)胞,復(fù)蘇存活率可達(dá)90%以上,所有種屬原代肝細(xì)胞均經(jīng)過體外代謝質(zhì)控,代謝活性強(qiáng)。
5 相關(guān)產(chǎn)品
關(guān) 于 我 們
匯智和源,致力于為創(chuàng)新藥研發(fā)企業(yè)及生命科學(xué)研究機(jī)構(gòu)提供高品質(zhì)的生物試劑,IPHASE為公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
相關(guān)產(chǎn)品清單
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