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近年來，造成人類感染的病原微生物日益復(fù)雜，種類增多，抗菌藥物濫用致使細(xì)菌耐藥，病原微生物已成為關(guān)注的焦點。據(jù)WHO統(tǒng)計，在中國，感染性疾病占所有疾病的50%以上。面對重癥感染患者，能否快速確認(rèn)感染病原體，成為后續(xù)對癥治療的關(guān)鍵，基于宏基因組新一代測序技術(shù)（metagenomicsnext-generationsequencing,mNGS）為解決這一問題提供了一個可能的突破方向。mNGS具有不依賴于傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)，直接對臨床樣本中的核酸進(jìn)行高通量測序，能夠快速、客觀的檢測臨床樣本中的較多病原微
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TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡常見問題及解決方案大家好，我是你們的實驗小助手小翊，上一期我們講到了細(xì)胞凋亡檢測的各種手段。這一期我們介紹其中的一種細(xì)胞凋亡檢測方法--TUNEL法，重點分析TUNEL檢測細(xì)胞凋亡常見問題及解決方案。首先要先了解一下TUNEL染色步驟，如下圖所示。圖1TUNEL染色操作步驟（注：細(xì)胞核染色步驟可選）用TUNEL試劑盒檢測細(xì)胞凋亡過程中，需要用到蛋白酶K、熒光素-dUTP、TdT酶等各種試劑，除此以外，還要設(shè)置陽性和陰性對照組，面對試劑盒各組分的作用以及繁瑣的操作步驟，許多
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精品推薦|NGS實驗小助手，純化、分選皆全能進(jìn)口磁珠用量大，價格高，實驗進(jìn)展不下去？翊圣DNA純化分選磁珠，滿足您的需求！DNA///片段純化與分選是高通量測序中文庫制備的必要環(huán)節(jié)。目前，市面上的AMPureXP磁珠幾乎占據(jù)半壁江山，但其高昂的價格令許多測序公司感到巨大的壓力。翊圣生物匠心研發(fā)專為二代測序設(shè)計的簡單高效、高通量DNA純化分選精品—HieffNGSTMDNASelectionBeads，可無縫替代AMPureXP產(chǎn)品，不僅性能優(yōu)異，而且質(zhì)優(yōu)價廉。產(chǎn)品介紹基于SPRI（SolidPh
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解讀翊圣生物DNA分選純化磁珠技術(shù)的優(yōu)勢與市場反饋
國產(chǎn)NGS試劑破局之路，解讀翊圣生物DNA分選純化磁珠技術(shù)的優(yōu)勢與市場反饋高通量測序技術(shù)（NGS）日趨成熟，應(yīng)用廣泛，但在整個過程中所使用的儀器、耗材和試劑，仍然還是由國外壟斷，這對于已經(jīng)占據(jù)測序10%產(chǎn)業(yè)規(guī)模，且在增長黃金期的中國企業(yè)來說并非長久之計。尤其是隨著歐美貿(mào)易保護(hù)、地緣政治以及“再工業(yè)化”的升溫，嚴(yán)重依賴進(jìn)口不僅導(dǎo)致我們在整個產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)中沒有議價權(quán)，同時還面臨著隨時被卡脖子的風(fēng)險。而今天需要和大家討論的是在NGS中，一個極其重要的試劑——分選/純化磁珠。*，樣本測序前需進(jìn)行文庫制備，制 -
5 min了解DNA磁珠的前世今生（含結(jié)果分析及FAQ解讀）
磁珠是高通量測序過程*產(chǎn)品，通過磁顆粒活性基團(tuán)在一定條件下可與核酸結(jié)合和解離的原理，將樣本中目的片段分離?？蓪崿F(xiàn)對核酸樣本的高通量自動化操作，廣泛應(yīng)用于基因測序以及分子診斷領(lǐng)域。背景篇磁珠的發(fā)明構(gòu)想初來自于挪威科技大學(xué)的化學(xué)家JohnUgelstad，他在1976年以聚苯乙烯為主要材料，制作出均勻磁化的球體粒子。1979年Vogelstein等報道在高濃度典化鈉存在的條件下，玻璃粉末作為吸附劑用于從瓊脂糖凝膠中提取DNA片段，而后基于硅膠和其他具有親水性表面載體的固相核酸純化技術(shù)廣泛發(fā)展起來。而 -
核酸酶，又稱廣譜核酸酶，英文名稱BenzonaseNuclease，一種來源于SerratiaMarcescen的非特異性核酸內(nèi)切酶，可在鏈內(nèi)任意核苷酸間進(jìn)行切割，將核酸*消化成3-8個堿基長度的5'-單磷酸寡核苷酸，能夠在非常廣泛的條件下降解所有形式的（雙鏈，單鏈，線狀，環(huán)狀，天然或變性）DNA和RNA。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步，科學(xué)家對于效率的要求越來越高，在消耗同樣的時間和精力下，他們更愿意選擇快速，的方法。傳統(tǒng)核酸去除主要是超聲法和DNase/RNase酶法，因為對應(yīng)的實驗周期長、去除效率低，
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得不到陽性克?。靠赡苁呛鲆暳诉@些細(xì)節(jié)……過去，提起“分子克隆”或“載體構(gòu)建”這兩個詞，大家可能想到的是傳統(tǒng)“酶切酶連法”，即用限制性內(nèi)切酶產(chǎn)生黏性末端，通過堿基互補(bǔ)配對，連接兩個片段的克隆方法。近年來，“同源重組技術(shù)”逐漸受到科研人員的歡迎，如翊圣HieffClone®一步法快速克隆技術(shù)。相比之下，同源重組技術(shù)操作更加簡單，不受到酶切位點的限制，可一次進(jìn)行多個片段的拼接，大大的提高了克隆效率。雖然同源重組技術(shù)操作簡單，但畢竟實驗過程是環(huán)環(huán)相扣的，一旦某個細(xì)節(jié)處理不好，都可能導(dǎo)致實驗失敗。為此，小
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細(xì)胞骨架的染色神器-鬼筆環(huán)肽細(xì)胞骨架是網(wǎng)狀纖維結(jié)構(gòu)，是高度動態(tài)的，不同時期有不同的形態(tài)。它主要是由微絲，微管和中間絲所組成的。微絲主要是肌動蛋白組成的，肌動蛋白分成肌動蛋白單體（G-actin）和纖維狀蛋白單體（F-actin）。游離的肌動蛋白還會有ATP和Mg+。微絲的組裝就是G-actin變成F-actin的過程。鬼筆環(huán)肽是一種雙環(huán)七肽，最早發(fā)現(xiàn)的環(huán)狀肽之一，是從鬼筆鵝膏（Amanitaphalloides）中分離出來的。通過結(jié)合和穩(wěn)定纖維狀肌動蛋白（F-actin）發(fā)揮功能，并有效防止肌動
