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原代細(xì)胞計數(shù)的操作步驟2017/3/14
（一）原代細(xì)胞計數(shù)1、將血球計數(shù)板及蓋片用擦試干凈，并將蓋片蓋在計數(shù)板上。2、將細(xì)胞懸液吸出少許，滴加在蓋片邊緣，使懸液充滿蓋片和計數(shù)板之間。3、靜置3分鐘。4、鏡下觀察，計算計數(shù)板四大格細(xì)胞總數(shù)，壓...
從原培養(yǎng)容器中分離細(xì)胞操作流程2017/3/9
細(xì)胞系從基層迅速分離細(xì)胞，且保持細(xì)胞完整性的一般步驟。這一步驟并不意味著對于所有細(xì)胞系的廣泛應(yīng)用，每一種系統(tǒng)*條件和施用濃度應(yīng)該根據(jù)經(jīng)驗加以確定。再次培養(yǎng)時檢測細(xì)胞的活性。細(xì)胞的活率應(yīng)該超過90%對于...
成纖維細(xì)胞排除法操作流程2017/3/7
1.原代細(xì)胞機械刮除法：是用不銹鋼絲末端插有橡膠刮頭(用膠塞剪成三角形插以不銹鋼絲)、或裹少許脫脂棉制成，裝入試管中高壓滅菌后備用(也可用特制電熱燒灼器刮除)。刮除程序為：(1)標(biāo)記：鏡下觀察，用不脫...
對淋巴細(xì)胞系進(jìn)行體外刺激預(yù)孵育、或板內(nèi)同步刺激培養(yǎng)2017/3/2
1、將抗原和淋巴細(xì)胞系在體外混合，刺激并預(yù)孵育，是通用的方法。預(yù)孵育的淋巴細(xì)胞，在置入ELISPOT板之前應(yīng)使用復(fù)溫到37℃的培養(yǎng)液清洗細(xì)胞1-2次。置入ELISPOT板以后通常在37℃培養(yǎng)5～6小時...
細(xì)胞電穿孔轉(zhuǎn)染操作步驟2017/2/28
原代細(xì)胞對于細(xì)胞轉(zhuǎn)染而言，目前主要是轉(zhuǎn)染試劑(多為脂質(zhì)體)的天下。磷酸鈣轉(zhuǎn)染的方法雖說有些out，但有些細(xì)胞還就認(rèn)準(zhǔn)這一套。不過，對于某些淋巴細(xì)胞而言，化學(xué)方法怎么都不奏效，那我們只能采取強硬手段，用...
植物細(xì)胞質(zhì)壁分離技術(shù)分析2017/2/23
(1)原代細(xì)胞質(zhì)壁分離法：成長的植物細(xì)胞一般具有中央液泡，在中央液泡和細(xì)胞壁之間為細(xì)胞質(zhì)的薄層及其內(nèi)外膜——液泡膜和質(zhì)膜。液泡中的胞液具有一定的溶質(zhì)勢(或稱滲透勢)，而活的原生質(zhì)特別是液泡膜和質(zhì)膜則具...
動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)研究開發(fā)和工業(yè)化2017/2/21
動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)研究開發(fā)和工業(yè)化動物細(xì)胞株（雜交瘤細(xì)胞、CHO細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞等）大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)及其生物反應(yīng)器工程可廣泛應(yīng)用于抗體、基因重組蛋白質(zhì)藥物、病毒疫苗等生物技術(shù)產(chǎn)品的研究開發(fā)和工業(yè)化，長期以來...
人類體細(xì)胞染色體標(biāo)本制備實驗原理和操作步驟2017/2/16
人類體細(xì)胞染色體標(biāo)本制備實驗原理和操作步驟實驗原理染色體是在顯微鏡下可見原代細(xì)胞有絲分裂過程中出現(xiàn)的結(jié)構(gòu)。因此，必須獲得染色體標(biāo)本才能進(jìn)行檢查分析，通常情況下，都是利用外周血淋巴細(xì)胞進(jìn)行核型分析。正常...
培養(yǎng)原代細(xì)胞時哪些問題需要注意2017/2/14
培養(yǎng)原代細(xì)胞時哪些問題需要注意1.原代細(xì)胞用1640加10%胎牛血清，有的種系用DMEM.血清要求質(zhì)量較高，在普通血清中細(xì)胞生長不太好。1640用雙蒸水溶解，按說明加入碳酸氫鈉。2.培養(yǎng)液中應(yīng)加入HE...
造血干細(xì)胞的基本特性2017/2/9
造血干細(xì)胞的基本特性造血干細(xì)胞的多向分化潛能使造血干細(xì)胞分化為各類祖細(xì)胞系,祖細(xì)胞又可以分化為各種類型的血細(xì)胞。在造血干細(xì)胞發(fā)育、成熟的過程中,除了分化為成熟的細(xì)胞,部分細(xì)胞會衰老、死亡。為了維持終生...
雜交瘤細(xì)胞技術(shù)分析2017/2/7
雜交瘤細(xì)胞技術(shù)分析克隆化的細(xì)胞可以在體外進(jìn)行大量培養(yǎng)，收集上清液而獲得大量的單一的克隆化抗體。不過體外培養(yǎng)法得到的單克隆抗體有限，其不能超過特定的細(xì)胞濃度，且每天要換培養(yǎng)液。而體內(nèi)雜交瘤細(xì)胞繁殖可以克...
體外培養(yǎng)的細(xì)胞系差異和分化2017/1/21
體外培養(yǎng)的細(xì)胞系差異和分化1、差異：細(xì)胞系離體后，失去了神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細(xì)胞間的相互影響，生活在缺乏動態(tài)平衡的相對穩(wěn)定環(huán)境中，日久天長，易發(fā)生如下變化：分化現(xiàn)象減弱；形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時間后...
選購細(xì)胞株需要考慮哪幾個因素2017/1/19
選購細(xì)胞株需要考慮哪幾個因素1、細(xì)胞株的生物等級，由于有些細(xì)胞株及菌株屬于管制品，所以從國外購貨比較麻煩。2、報關(guān)時盡量提供比較充足的證明材料，以免擔(dān)擱時間而導(dǎo)致干冰揮發(fā)完細(xì)胞株死亡，甚至于被退回給發(fā)...
原代細(xì)胞生物學(xué)從哪幾個方面學(xué)習(xí)2017/1/17
原代細(xì)胞生物學(xué)從哪幾個方面學(xué)習(xí)*、認(rèn)識原代細(xì)胞生物學(xué)課程的重要性，正如原子是物理性質(zhì)的zui小單位，分子是化學(xué)性質(zhì)的zui小單位，細(xì)胞是生命的基本單位。50年代以來諾貝爾生理與醫(yī)學(xué)獎大都授予了從事細(xì)胞...
原代細(xì)胞HEPES緩沖液的使用方法及配制2017/1/12
原代細(xì)胞HEPES緩沖液的使用方法及配制(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中，再過濾除菌。每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES，待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2，濾過除菌...
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