無細胞蛋白表達服務
- 公司名稱 北京義翹神州科技股份有限公司
- 品牌 義翹神州/Sino Biological
- 型號
- 產(chǎn)地 北京
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/1/15 14:50:59
- 訪問次數(shù) 7
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無細胞蛋白表達服務
無細胞蛋白合成服務優(yōu)勢
無細胞表達服務流程
無細胞合成服務內(nèi)容
無細胞合成系統(tǒng)示意圖
案例展示
高純度VHH表達
VHH synthesized by CFPS with purity by SDS-PAGE and SEC-HPLC >95%.
高通量scFv表達
From gene to purified 50 scFvs, Sino Biological completed synthesis by CFPS in only 5 days.
無細胞合成與HEK293細胞表達的VHH體外抗原結(jié)合活性一致
anti-IL6R VHH 
Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized IL6R at 0.5 μg/ml (100 μL/well) can bind anti-IL6R nanobody expressed by CFPS system and HEK293 Cell respectively. | anti-TROP2 VHH 
Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized TROP2 at 0.5 μg/ml (100 μL/well) can bind anti-TROP2 nanobody expressed by CFPS system and HEK293 Cell respectively. |
無細胞表達系統(tǒng)--新一代蛋白表達技術(shù)
無細胞表達系統(tǒng)的基本原理是利用來源于細胞的轉(zhuǎn)錄翻譯等元件，搭配能量體系和原料體系，共同在體外組成能夠直接從DNA合成蛋白質(zhì)的反應體系。
無細胞表達系統(tǒng)具備很多基于細胞合成蛋白的優(yōu)勢，如快速省時，不需培養(yǎng)細胞，幾小時就可獲得蛋白。同時在高通量蛋白篩選、快速蛋白合成、非天然氨基酸引入甚至AI自動化合成蛋白等領(lǐng)域具有巨大的潛力和應用價值。
無細胞蛋白合成服務常見問題解答
無細胞合成（CFPS）體系相對于細胞體系有哪些優(yōu)勢？
無細胞表達系統(tǒng)的優(yōu)勢主要體現(xiàn)在：
• 可自動化操作簡便、快捷——成本低（無需培養(yǎng)細胞和細菌相關(guān)的場地設施）、表達時間短（3h）、單位表達量高。
• 蛋白表達工程化（Cell-free protein engineering）——無細胞合成系統(tǒng)作為一個開放式的系統(tǒng)，可以向體系中自由添加所需的成分以調(diào)控蛋白的正確合成。例如可以向系統(tǒng)中加入Fe2+、Mn2+和Cu2+等金屬離子促進含有對應離子蛋白的正確合成；可以有效表達抗菌肽等毒性蛋白并實現(xiàn)規(guī)模化目的蛋白的生產(chǎn)。
• 適合原型研究（cell-free prototyping），整體原料均為外加，活性物質(zhì)之間發(fā)生的化學酶促反應使整個過程相對可控。
真核來源的蛋白是否必須用真核表達系統(tǒng)？
并非如此，真核來源的蛋白除了傳統(tǒng)的哺乳動物表達系統(tǒng)，還可以利用無細胞蛋白合成。無細胞系統(tǒng)是一套酶促級聯(lián)反應，可以添加很多其他組分甚至是真核來源的提取物來實現(xiàn)真核蛋白的表達。如果某些目標蛋白（比如抗體功能性片段scFv和VHH）的功能不依賴翻譯后修飾，在這種情況下，不管是無細胞系統(tǒng)還是HEK293系統(tǒng)，兩者表達的活性無明顯差異。
無細胞合成系統(tǒng)是否適用于高通量，表達量如何？少量蛋白的檢測是否也適用？
無細胞表達系統(tǒng)非常適合高通量表達，其產(chǎn)量高可到 mg/mL 級別，抗體和抗體功能性片段是 100 μg/mL 級別。對于少量蛋白的檢測需要建立相應的檢測方法，如您想進一步了解，我們可以協(xié)助進行方法學的設計。
對于原核體系難以表達的真核來源蛋白，無細胞表達體系有什么優(yōu)勢嗎？
因為其開放式系統(tǒng)可以添加很多其他組分甚至是真核來源的提取物來實現(xiàn)真核蛋白的正確合成。例如我們聚焦的VHH、VHH-Fc等都可以實現(xiàn)無細胞系統(tǒng)中上清表達，但是這些蛋白在原核表達中往往以錯誤的形式存在。
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