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手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列:如何正確選擇逆轉(zhuǎn)錄引物?
手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列:如何正確選擇逆轉(zhuǎn)錄引物?通過上期《手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列:逆轉(zhuǎn)錄酶,你真的了解嗎?》一文的學(xué)習(xí),相信大家對逆轉(zhuǎn)錄酶有了一定的了解,但選對了逆轉(zhuǎn)錄酶并不意味著你的逆轉(zhuǎn)錄實驗就大功告成,逆轉(zhuǎn)錄引物的正確選擇也是重要一環(huán)。根據(jù)不同實驗?zāi)康模孓D(zhuǎn)錄引物的選擇也是大相徑庭。接下來,小翌與大家一同學(xué)習(xí)下逆轉(zhuǎn)錄引物的相關(guān)知識,學(xué)會如何正確選擇逆轉(zhuǎn)錄引物。PART01逆轉(zhuǎn)錄引物介紹1Oligo(dT)Oligo(dT)是多聚胸腺嘧啶、T重復(fù)寡核苷酸,就 -
雙螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng)~實驗操作篇自1990年螢光素酶生物傳感器技術(shù)誕生以來,單螢光素酶檢測系統(tǒng)到雙螢光素酶檢測系統(tǒng)的發(fā)展,為科研人員提供了更為嚴(yán)謹?shù)膶嶒炇侄?。雙螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng)在單報告基因的基礎(chǔ)上引入了“內(nèi)參對照”報告基因,可以排除不同組之間細胞生長狀況、細胞數(shù)目以及轉(zhuǎn)染效率帶來的干擾,起到校正的作用,從而使實驗結(jié)果更為可靠。今天小翌將從雙螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng)的原理與應(yīng)用開篇,給大家分享雙螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng)的實驗操作流程。一雙螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng)原理螢火蟲螢光素酶是一
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一眼鎖定,全程示蹤,這條漂亮的彩虹marker,請接收!YEASEN最新升級版彩色蛋白Marker——GoldBand20350,在彩色預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)包含了從8kDa到180kDa共10種高度純化并預(yù)染的重組蛋白質(zhì),自上市以來,不斷受到大家的支持和喜愛,小翌在此分享近期用戶使用情況,歡迎圍觀~圖1.電泳緩沖條件下,蛋白Marker的指示圖使用反饋上面是我們蛋白Marker的標(biāo)準(zhǔn)指示圖,接下來讓我們來看一下使用了翌圣GoldBand20350的同學(xué)們拍出來的彩虹條帶~南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生科院曹同學(xué)▲
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HieffUNICON®UniversalBlueqPCRSYBRGreenMasterMix——致力于簡化熒光定量實驗進程的性能怪獸HieffUNICON®UniversalBlueqPCRSYBRGreenMasterMix用UniversalROX替代了傳統(tǒng)ROX,彌補不同儀器平臺的光程差,實現(xiàn)了適合所有qPCR儀器。另外,該產(chǎn)品采用抗體法修飾,同時配方添加了基因擴增的促進因子,大大提升了該產(chǎn)品的擴增性能。產(chǎn)品特點全儀器平臺通用:預(yù)混特定類型參比染料,無需調(diào)整ROX濃度;易于示蹤:藍色預(yù)混
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客戶反饋 | 來自qPCR Mix的擴增曲線,比你想象的更優(yōu)美
客戶反饋|來自qPCRMix的擴增曲線,比你想象的更優(yōu)美YeasenqPCRmix產(chǎn)品自上市,一直深受新老客戶的喜愛,加上近期最美曲線活動的開展,更是好評如潮。面對如此優(yōu)秀的作品,小翌已經(jīng)迫不及待地想和大家一同分享近期收到的反饋啦~高分文章展示翌圣qPCRmix頻頻出現(xiàn)在大牛們的高分文章中,以下展示部分。Tips:下拉查看更多,點擊圖片可查看原文!北京大學(xué)(圖源NatureBiotechnology-IF54.908)中科院分子植物科學(xué)創(chuàng)新中心(圖源Nature雜志-IF42.778)武漢大學(xué)( -
如何遠離外泌體研究煩惱(內(nèi)附解決方案)2013年,諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎授予了三位在細胞間囊泡運輸?shù)恼{(diào)控機制領(lǐng)域做出突出貢獻的科學(xué)家,自此開啟了外泌體研究的新時代?!鴪D1.PubMed外泌體相關(guān)文章統(tǒng)計(數(shù)據(jù)來源PubMed)▲圖2.國自然外泌體課題中標(biāo)數(shù)量外泌體為什么這么火?01來源外泌體是細胞在生理或是病理狀態(tài)下分泌的直徑約為30–150nm的被雙層脂質(zhì)膜包裹的細胞外囊泡,是由細胞中的多泡體(Multivesicularbody,MVB)和細胞膜融合釋放其內(nèi)部的管腔內(nèi)泡(Intralumina
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導(dǎo)讀近年來,RNA二代測序技術(shù)成為生命進展和疾病診斷等領(lǐng)域的重要研究手段。但是,不同來源的樣本中的RNA種類占比具有極大的不均一性,如正常細胞中核糖體rRNA約占總RNA的90%?95%,血液中珠蛋白的mRNA約占總mRNA的76%以上,這些RNA的存在占據(jù)了大部分的測序數(shù)據(jù),嚴(yán)重影響到低豐度RNA的檢測,提高了測序的成本。圖1.人類組織/細胞RNA組成分布因而在轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究中,rRNA的去除,對于實現(xiàn)RNA經(jīng)濟高效的測序至關(guān)重要。傳統(tǒng)rRNA去除操作復(fù)雜,耗時長目前國內(nèi)主要以RNaseH酶消化
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手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列:逆轉(zhuǎn)錄酶,你真的了解嗎?
手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列:逆轉(zhuǎn)錄酶,你真的了解嗎?通過上期《手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列:如何評估RNA質(zhì)量?》一文的學(xué)習(xí)。相信大家已經(jīng)獲得了優(yōu)質(zhì)的RNA,即將進入逆轉(zhuǎn)錄環(huán)節(jié)。對于逆轉(zhuǎn)錄,大家都知道它是以RNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,合成互補DNA(complementaryDNA,cDNA)的過程(如圖1)。但對于過程中起關(guān)鍵作用的逆轉(zhuǎn)錄酶,可能比較陌生。接下來,讓小翌給大家介紹下逆轉(zhuǎn)錄酶的相關(guān)理論知識。圖1.逆轉(zhuǎn)錄過程示意圖逆轉(zhuǎn)錄酶的發(fā)現(xiàn)1970年美國科學(xué)家H