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精品推薦翊圣核酸清除神器，輕松搞定核酸氣溶膠污染難題聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymeraseChainReaction，PCR）是一種體外擴(kuò)增核酸片段的基因檢測技術(shù)，由于PCR技術(shù)操作簡便，靈敏度高，因此被廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)實驗研究。分子生物學(xué)實驗室因長期做PCR實驗，環(huán)境中很容易出現(xiàn)核酸（DNA/RNA）懸浮顆粒，這種懸浮顆粒也就是我們常說的核酸氣溶膠污染。核酸氣溶膠污染會導(dǎo)致PCR實驗出現(xiàn)假陽性結(jié)果，導(dǎo)致結(jié)果不可靠。大家常用的紫外消毒、酒精擦拭等方法，效果并不明顯，這困擾著無數(shù)實驗人員。翊圣核
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靶標(biāo)伴“His”，蛋白純化明明白白！蛋白純化簡介蛋白純化是將目標(biāo)蛋白從實驗樣本的總蛋白中分離出來，同時仍保留目的蛋白的生物學(xué)活性及化學(xué)完整性。在構(gòu)建載體階段，除了一些必要的表達(dá)元件，還需要考慮的密碼子優(yōu)化以及標(biāo)簽的選擇。選擇合適的標(biāo)簽不但有利于蛋白的純化，促進(jìn)蛋白的可溶性，同時也不能影響蛋白的結(jié)構(gòu)功能和下游應(yīng)用。以下簡單列舉幾個常見蛋白標(biāo)簽：表1不同蛋白純化標(biāo)簽介紹標(biāo)簽大小kDa序列純化效價標(biāo)簽切除HIS標(biāo)簽~0.84HHHHHH+TEV蛋白酶GST26+3C蛋白酶/PSPMBP42+Facto
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識破支原體污染，拯救你的細(xì)胞支原體（mycoplasma）是一種沒有細(xì)胞壁的小原核細(xì)胞。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，支原體污染率達(dá)到60%以上，當(dāng)細(xì)胞（特別是傳代細(xì)胞）被支原體污染后，細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA及蛋白表達(dá)發(fā)生改變，污染嚴(yán)重時細(xì)胞生長緩慢，細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變，并出現(xiàn)細(xì)胞病變。因而細(xì)胞培養(yǎng)過程中，防止支原體污染是一個世界性的難題。圖1支原體污染細(xì)胞后，細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變（來源：該圖片來源于網(wǎng)絡(luò)）支原體污染細(xì)胞后很難察覺，同時若細(xì)胞培養(yǎng)過程受到了支原體污染，*清除支原體也是非常困難的。因此在細(xì)胞培養(yǎng)過程
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FFPE樣本是什么？做病理的小伙伴對FFPE樣本肯定不陌生，F(xiàn)FPE（Formalin-FixedａndParrffinEmbedded）樣本是福爾馬林固定石蠟包埋的樣本，固定包埋的方法能夠使組織在常溫保存很長時間。早FFPE樣本主要是用于病理形態(tài)學(xué)觀察，近些年，隨著精////準(zhǔn)醫(yī)療的滲透發(fā)展，F(xiàn)FPE樣本在臨床病理檢驗、腫瘤基因檢測中也得到廣泛使用。圖1FFPE樣本人們將FFPE樣本中的核酸提取出來進(jìn)行建庫，然后利用高通量測序技術(shù)對FFPE樣本的核酸進(jìn)行測序和分析，就能得到病理和腫瘤相關(guān)的很多
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“開弓沒有回頭箭”，核酸質(zhì)量是分子實驗成功的基礎(chǔ)核酸提取是實驗室蕞常見實驗，我們經(jīng)常會抽提基因組或者總RNA，少則幾份，多則上百份。準(zhǔn)備提取材料，加入TRIzol或裂解液，加入氯////仿、異丙醇，純化柱或手提進(jìn)行核酸沉淀和洗滌、洗脫，半小時后就可以得到核酸樣本。因為提取實驗太平常，以至于我們從來沒有思考過這個實驗背后的問題。大家通常測濃度、測比值，而教科書中已明確告知我們測出來數(shù)值（純粹核酸的比值范圍是固定的）代表了核酸品質(zhì)，但偏離標(biāo)準(zhǔn)范圍的數(shù)值往往被忽視，對實驗結(jié)果的影響往往得不到很好的解釋
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基因測序的這些年P(guān)art1測序平臺的發(fā)展歷程1865年，Sanger提出的雙脫氧末端終止測序法后對于基因序列測定方法具有極///大的推動作用。隨后為了彌補(bǔ)一代測序通量低的缺點，通量更高的二代測序技術(shù)以及讀長更長的三代測序技術(shù)迅速發(fā)展起來。在此小翊為大家整理了從一代到三代測序平臺以及有代表性測序儀器的發(fā)展歷程。圖1測序平臺的發(fā)展歷程Part2二代測試的風(fēng)華年代各大公司對于二代測序市場的競爭史相當(dāng)激烈的，目前在市場中占有穩(wěn)固地位的主要是Illumina、MGI（華大智造）以及LifeTechnolo
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美國所謂的“凈網(wǎng)計劃”，IVD行業(yè)會不會是下一個目標(biāo)？
美國所謂的“凈網(wǎng)計劃”，IVD行業(yè)會不會是下一個目標(biāo)？IVD，即體外診斷，是醫(yī)療器械的第—大市場，它主要分為4大賽道：生化診斷、免疫診斷、分子診斷、POCT。其中分子診斷被稱為IVD的黃金賽道，分子診斷技術(shù)的迭代創(chuàng)新，催化了行業(yè)格局日新月異的變化。近些年來，分子診斷方興未艾，其中二代高通量測序（NGS）一騎領(lǐng)///先，憑借不斷增加的檢測通量和日益降低的檢測成本，帶動了臨床應(yīng)用的突破，大大推動了分子診斷在遺傳病、病原體、癌基因檢測等領(lǐng)域的蓬勃發(fā)展。在腫瘤領(lǐng)域，頭部公司燃石醫(yī)學(xué)、泛生子于今年6月先后 -
PCR-Free建庫，你get到了嗎？高通量測序中，常規(guī)的文庫構(gòu)建需要PCR擴(kuò)增，一方面，是為了對微量DNA樣本進(jìn)行擴(kuò)增，提高文庫產(chǎn)量，另一方面，可以放大熒光信號，讓測序儀更容易捕獲和識別熒光信號，提高測序準(zhǔn)確度。但是，PCR就像一把“劍”，在解決了樣本起始量低的問題并起到放大熒光信號作用的同時，卻也引入了擴(kuò)增錯誤和偏向性，不能地呈現(xiàn)基因組序列“真實面貌”。因此，PCR-Free技術(shù)的引入，既具備了PCR的優(yōu)勢，也克服了PCR的缺點。什么是PCR-Free技術(shù)？常規(guī)NGS文庫構(gòu)建的核心步驟為：基
