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支鏈淀粉含量試劑盒說(shuō)明書(shū)

分光光度法 50 管/48 樣

支鏈淀粉含量試劑盒 淀粉系列

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：

支鏈淀粉是具有高度分支的多糖，淀粉中直鏈淀粉和支鏈淀粉的比例和含量對(duì)淀粉產(chǎn)品的加工、物化特性、糊化溫度等有著直接的影響，對(duì)于不同比例直、支鏈淀粉的淀粉的研究具有重要的意義。

測(cè)定原理：

利用 80％乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開(kāi)，利用雙波長(zhǎng)比色法測(cè)定支鏈淀粉含量。

組成：

自備儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰、yi醚和蒸餾水。

淀粉提?。?/span>

稱(chēng)取 0.01~0.02g 烘干樣本（建議稱(chēng)取約 0.01g）于研缽中研碎，加入 1mL 試劑一，充分勻漿后轉(zhuǎn)移到 EP 管中，80℃水浴提取 30min，3000g，25℃離心 5min，棄上清，留沉淀，加入 1mL 試劑二（yi醚）振蕩 5min，3000g，25℃離心 5min，棄上清，留沉淀，加入 1mL 試劑三充分溶解，90℃水浴 10min，冷卻后待測(cè)。

測(cè)定步驟：

分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上，蒸餾水調(diào)零。

測(cè)定管：在EP 管中依次加入 100uL 樣本， 70uL 試劑四，600uL 蒸餾水，10uL 試劑五，220uL 蒸餾水，混勻，分別測(cè)定 550 和 743nm 處吸光值，ΔA 測(cè)定=A550-A743。

空白管：在EP 管中依次加入 100uL 試劑三，70uL 試劑四，600uL 蒸餾水，10uL 試劑五，220uL 蒸餾水，混勻，分別測(cè)定 550 和 743nm 處吸光值，ΔA 空白=A550-A743。

支鏈淀粉含量計(jì)算：

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y=0.1214x+0.0076；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y 為吸光值。

1、按照蛋白濃度計(jì)算

支鏈淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA 測(cè)定-ΔA 空白-0.0076)×V1]÷0.1214 ÷(V1×Cpr)=8.24×(ΔA 測(cè)定-ΔA 空白-0.0076) ÷Cpr

2、按樣本干重計(jì)算

支鏈淀粉含量(mg/g 干重)= [(ΔA 測(cè)定-ΔA 空白-0.0076)×V1] ÷0.1214÷(W×V1÷V2) =8.24×(ΔA 測(cè)定-ΔA 空白-0.0076) ÷W

V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.1mL；V2：加入提取液體積，1 mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL； W：樣本質(zhì)量，g

最di檢測(cè)限為 10mg/g 干重或 0.1mg/mgprot。

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