產(chǎn)品簡介：

本產(chǎn)品是在動物 DNA 純化試劑盒基礎(chǔ)上優(yōu)化改良而得，專門針對海洋動物及其他軟體動物的基因組 DNA 提取的試劑盒，可用于魚類、蝦類、貝類、烏賊、蝸牛等動物，可以有效去除海洋動物及其他軟體動物組織中的蛋白、脂肪及其他有機化合物等雜質(zhì)。

產(chǎn)品特點：

1.使用本試劑盒提取的基因組 DNA 可適用于各種常規(guī)分子生物學操作，如:酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern 雜交等試驗。

2.提取到的基因組 DNA 完整性，其中最長可以到達長度一般在 20-50kb。

3.DNA 純凈，OD260/280 一般都在 1.9 左右、DNA 片段大小在 30-50Kb 左右，可直接用于 PCR、酶切、雜交等。

4.操作簡單安全，1 小時內(nèi)即可獲得超純的基因組 DNA，純化過程中不需要使用苯-酚氯仿等有機試劑。

5.應用廣泛，適用于多種動物細胞和動物組織等。

6.性價比高，質(zhì)量和國外同類試劑盒相當，價格更低。

7.海洋動物 DNA 純化試劑盒（過柱法）只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

成分規(guī)格包裝

海洋動物 DNA 純化溶液 A50mL60mL 本色瓶

海洋動物 DNA 純化溶液 B15mL20mL 棕色瓶

海洋動物 DNA 純化溶液 C50mL60mL 本色瓶

蛋白酶 K 溶液，10mg/mL1mL1.5mL 白蓋管

通用洗柱液50mL60mL 本色瓶

DNA 洗脫液

（基因組純化專用）10mL10mL 本色瓶

離心吸附柱50 套塑料袋

使用手冊1 份無

運輸及保存

常溫運輸和保存，但蛋白酶 K 溶液(10mg/mL)需要低溫運輸，-20℃保存，有效期

一年。

自備試劑

無水乙醇、RNase A 溶液（100mg/mL）

使用方法：

1.使用前請先在海洋動物 DNA 純化溶液 C 中加入 17mL 自備的無水乙醇，在專用洗柱液中加入 60mL 的自備無水乙醇。

2.切取不多于 30mg 的海洋動物及其他軟體組織材料，放入裝有 200μL 海洋動物

DNA 純化溶液 A 的離心管中，渦旋振蕩 15 秒。注意：根據(jù)提取的組織不同，起始量也稍有不同，腮的細胞量較大，一般建議提取量不超過 20mg。如果需要去除 RNA，可加入自備的 40μL RNase A（100mg/mL）溶液，振蕩 15 秒，室溫放置 5 分鐘。

3.加入 20μL 蛋白酶 K 溶液，渦旋混勻，簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。在 56℃下放置，直至海洋動物組織完-全溶解，簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠，再進行下一步驟。注意：不同動物組織裂解時間不同，通常需 0.5-2 小時即可完成。扇貝組織 0.5 小時基本可裂解完-全，蝦和魚類組織 1 小時。每小時振蕩混合樣品 2-3 次，每次振蕩混勻 15 秒。

4.加入 200μL 海洋動物 DNA 純化溶液 B，充分顛倒混勻，70℃放置 10 分鐘，溶液應變清亮，簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。注意：加入海洋動物 DNA 純化溶液 B 時可能會產(chǎn)生白色沉淀，一般 70℃放置時會消失，不會影響后續(xù)實驗。如溶液未變清亮，說明細胞裂解不徹-底，可能導致提取 DNA 量少和提取出的DNA 不純。

5.在混合液中加入 200μL 無水乙醇，充分顛倒混勻，此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀，簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。

6.將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個硅膠膜離心吸附柱中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm 離心 30 秒，倒掉廢液，將吸附柱放回收集管中。

7.向離心吸附柱中加入 500μL 海洋動物 DNA 純化溶液 C，12,000rpm 離心 30秒，倒掉廢液，將吸附柱放入收集管中。

8.向吸附柱中加入 600μL 專用洗柱液，12,000rpm 離心 30 秒，倒掉廢液，將吸附柱放入收集管中。

9.重復上步操作一次。

10.將硅膠膜吸附柱放回收集管中，12,000rpm 離心 2 分鐘，倒掉廢液。將吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘，以徹-底晾干吸附材料中殘余的專用洗柱液。注意：這一步的目的是將吸附柱中殘余的專用洗柱液去除，否則其中的乙醇殘留會影響后續(xù)的酶反應（酶切、PCR 等）實驗。

11.將硅膠膜離心吸附柱轉(zhuǎn)入一個干凈的離心管中，向吸附膜的中間部位懸空滴加50-200μLDNA 洗脫液（基因組純化專用），室溫放置 2-5 分鐘，12,000rpm離心 1 分鐘，將溶液收集到離心管中。注意：專用 DNA 洗脫液的體積不應少于 50μL，體積過小影響回收效率。為增加基因組 DNA 的得率，可將離心得到的溶液再加入吸附柱中，室溫放置 2 分鐘，12,000rpm 離心 1 分鐘。洗脫液

的 pH 值對于洗脫效率有很大影響。若用超純水做洗脫液應保證其 pH 值在7.0-8.5 范圍內(nèi)，pH 值低于 7.0 會降低洗脫效率；且 DNA 產(chǎn)物應保存在-20℃，以防 DNA 降解。

選擇我們的海洋動物 DNA 純化試劑盒（過柱法），就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！