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漲知識(shí) | 酶定向進(jìn)化之突變體文庫篩選技術(shù)大全
上期，我們介紹了酶定向進(jìn)化的突變體文庫構(gòu)建技術(shù)（點(diǎn)擊查看詳情）。高質(zhì)量的突變體文庫是定向進(jìn)化的基礎(chǔ)，與之相匹配的是高效、靈敏的突變體篩選技術(shù)手段。根據(jù)突變體酶參與反應(yīng)的場所來區(qū)分，篩選技術(shù)可分為體內(nèi)和體外篩選，篩選的通量和準(zhǔn)確度正隨著技術(shù)的不斷升級(jí)而提升。體內(nèi)篩選體內(nèi)篩選是由菌株篩選衍生而來，目標(biāo)酶活性與菌株生長、環(huán)境中底物代謝程度相關(guān)，性能缺陷的酶不足以支撐宿主形成單克隆，或無法使底物發(fā)生顯著變化。該方法適用于篩選與細(xì)菌生長、抗生素耐受等關(guān)鍵代謝途徑相關(guān)的酶，或可使底物發(fā)生顯著顏色變化的蛋白。 -
想提高早篩靈敏度？這個(gè)不能錯(cuò)過！DNA甲基DNA甲基化修飾在維持正常細(xì)胞功能、基因組結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、遺傳印記、胚胎發(fā)育、及腫瘤和疾病的發(fā)生、發(fā)展起關(guān)鍵作用。5mC可以導(dǎo)致基因沉默或基因表達(dá)水平降低，而5hmC則會(huì)導(dǎo)致基因激活或基因表達(dá)水平增高，研究表明腫瘤抑癌基因的過甲基化或原癌基因的低甲基化在多種腫瘤中被發(fā)現(xiàn)。因此，分析基因組的甲基化水平具有重要的臨床意義。DNA甲基化與腫瘤早篩的最新研究進(jìn)展甲基化與肺癌早篩《FrontiersinOncology》發(fā)表了DNA甲基化于肺癌早篩的重要進(jìn)展。肺腺癌樣本
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干貨|翌圣核酸提取寶典，建議先收藏！核酸作為一切分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ)，而且提取的核酸質(zhì)量高低也是決定下游實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵因素之一。磁珠法提取和硅膠膜離心柱法提取是的兩種提取方法。那么，這兩種提取方法各有什么特點(diǎn)？提取流程與原理又是什么呢？核酸提取過程中的常見問題有哪些呢？硅膠膜離心柱法核酸提取原理硅膠膜表面的硅醇基團(tuán)呈弱酸性，其水化后帶負(fù)電。當(dāng)溶液中存在一定濃度的陽離子后，形成的陽離子橋能夠中和DNA和硅醇基團(tuán)之間的表面負(fù)電荷，從而使DNA牢固地吸附在硅膠膜表面。反之，處于低鹽水溶液狀態(tài)下時(shí)，由于
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翌圣ZymeEditor™精品盤點(diǎn)之脫氧核糖核酸酶I（DNase I）
脫氧核糖核酸酶I（DeoxyribonucleaseI,DNaseI），是一種可以消化單鏈或雙鏈DNA的非特異性核酸內(nèi)切酶。它能夠水解磷酸二酯鍵，產(chǎn)生含有5'-磷酸基團(tuán)和3'-OH基團(tuán)的單脫氧核苷酸和寡脫氧核苷酸。DNaseI最佳的工作pH范圍是7-8，其活性依賴于Ca2+，并可被二價(jià)金屬離子如Mn2+，Mg2+，Zn2+等激活。在Mg2+存在條件下，DNaseI隨機(jī)剪切雙鏈DNA的任意位點(diǎn)；Mn2+存在條件下，DNaseI可在同一位點(diǎn)剪切DNA雙鏈，形成平末端，或1-2個(gè)核苷酸突出的粘末端。圖 -
翌圣重組蛋白表達(dá)技術(shù)平臺(tái)，為您提供Hiacti™高活性重組蛋白產(chǎn)品
研發(fā)背景重組蛋白目前已被廣泛應(yīng)用于干細(xì)胞和類器官培養(yǎng)、重組蛋白藥物、CAR-T細(xì)胞治療、抗體藥物等熱門研究領(lǐng)域。隨著生物藥行業(yè)的高速發(fā)展，重組蛋白市場發(fā)展迅猛，對(duì)品質(zhì)的原料需求逐年遞增?；诳蛻魬?yīng)用場景出發(fā)，為了滿足科學(xué)研究及工業(yè)場景對(duì)重組蛋白不斷升級(jí)的應(yīng)用需求，針對(duì)重組蛋白的蛋白活性低、批次間穩(wěn)定性差等問題，翌圣生物基于自身多年研發(fā)生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)的基礎(chǔ)上，建立了創(chuàng)新型重組蛋白表達(dá)與純化平臺(tái)，專注于提供高活性的重組蛋白。技術(shù)平臺(tái)1.多宿主（大腸、酵母、昆蟲、哺乳動(dòng)物細(xì)胞）高效表達(dá)技術(shù)：高密度發(fā)酵 -
國產(chǎn)酶逆襲，單細(xì)胞全長逆轉(zhuǎn)錄酶助力國產(chǎn)單細(xì)胞技術(shù)騰飛
單細(xì)胞技術(shù)有多火？不用小翌多說。度娘隨便一搜，單細(xì)胞技術(shù)介紹眼花繚亂；Pubmed搜索Singlecell，高分文章數(shù)不勝數(shù)；更不論還有各種年度技術(shù)、年度先進(jìn)技術(shù)等榮耀加持。從早期的Smart-seq、Drop-seq到后面的Singlecell（單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組、單細(xì)胞表觀組、單細(xì)胞多組學(xué)），甚至后面的單細(xì)胞代謝組、單細(xì)胞蛋白組，單細(xì)胞技術(shù)不段突破極限，為人類生物科學(xué)事業(yè)增加更多的新見解、新思路。在單細(xì)胞技術(shù)發(fā)展的道路上，科研人員一直呼吁國產(chǎn)替代，國產(chǎn)單細(xì)胞儀器也如破竹之勢(shì)占據(jù)了一定的市場，不僅進(jìn) -
假病毒（pseudovirus）又稱“偽病毒”，是一類嵌合型病毒顆粒，是在一種復(fù)制缺陷型病毒（病毒載體）的表面上表達(dá)另一種病毒的重組糖蛋白的嵌合病毒顆粒[1,2]。它的基因通常被改變或修飾，具毒模擬的物理結(jié)構(gòu)和特異性核酸序列的病毒樣粒子，其分析特性與真實(shí)病毒相似，但不具備自我復(fù)制和感染的能力，能夠參與到病毒檢測從提取到擴(kuò)增的全過程。具有生物安全性的同的可作為測量標(biāo)準(zhǔn)，用于病毒核酸定性和定量測量方法的驗(yàn)證評(píng)價(jià)以及實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制及疫苗和藥物的中和抗體檢測。圖1：病毒模式圖翌圣生物提供可溯源并具有高
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干貨│產(chǎn)品Taq酶抗體，賦能分子診斷產(chǎn)業(yè)升級(jí)！
TaqDNA聚合酶的非特異擴(kuò)增是PCR實(shí)驗(yàn)中的常見問題，非特異擴(kuò)增直接影響檢測結(jié)果的判讀并且會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增靈敏度下降，甚至目標(biāo)片段的得率下降等。利用酶修飾劑在常溫下封閉TaqDNA聚合酶酶活中心，抑制常溫下Taq酶的DNA聚合酶活性，是目前抑制非特異性擴(kuò)增的方式。翌圣開發(fā)的雙封閉抗體，不僅可以封閉TaqDNA聚合酶的聚合酶活性，還能同時(shí)封閉TaqDNA聚合酶的外切酶活性，雙管齊下，既能有效防止錯(cuò)配或引物二聚體引起的非特異性擴(kuò)增，又能防止物料降解產(chǎn)生非特異信號(hào)，雙重提升試劑特異性，使檢測試劑在運(yùn)輸或室
