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分子克隆作為分子生物學(xué)的一項(xiàng)成熟技術(shù)，幾乎每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都或多或少的會涉及。在分子克隆實(shí)驗(yàn)中，限制性內(nèi)切酶是克隆產(chǎn)品，但大家也常常因?yàn)橄拗菩詢?nèi)切酶的各種問題而感到煩擾。比如小翌常被問到的：1.限制性內(nèi)切酶種類這么多，不知道如何選擇；2.酶切不完或出現(xiàn)亂切、錯(cuò)切的情況；3.酶切速度慢，需要1h甚至過夜酶；4.多酶切還需要選擇多款酶切緩沖液。……針對第1個(gè)問題，小翌會簡單介紹一下什么是限制性內(nèi)切酶，不同內(nèi)切酶的分類如何，讓您對限制性內(nèi)切酶有一個(gè)更全面的認(rèn)識。針對第2~4個(gè)問題，翌圣FuniCut®系列快
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干貨 | 病毒滴度檢測，除了空斑試驗(yàn)還有更好的選擇
什么是病毒滴度呢？就像重組蛋白合成以后需要檢測純度一樣，病毒包裝后的效力如何，如何定量，也是必須要檢測的，專業(yè)術(shù)語稱為：病毒滴度的測定。病毒滴度是指單位體積液體中具有生物活性的病毒顆粒數(shù)，是衡量病毒數(shù)量和毒力的一個(gè)重要指標(biāo)。病毒滴度測定是指確定給定樣品中病毒顆粒的濃度的過程。它是評估病毒產(chǎn)品，如疫苗、基因治療載體或診斷試劑的質(zhì)量和效力的一個(gè)重要參數(shù)。病毒滴度檢測方法比較病毒滴度的測定方法有多種，主要分為物理方法和生物方法兩大類。物理方法是通過測定病毒顆粒的大小、形態(tài)、數(shù)量、電荷、光學(xué)性質(zhì)等，來推 -
CUT&Tag優(yōu)于ChIP-Seq的關(guān)鍵竟是它？
CUT&Tag優(yōu)于ChIP-Seq的關(guān)鍵竟是它？前面幾期，小翌介紹過“翌圣轉(zhuǎn)座酶系列產(chǎn)品助力NGS文庫構(gòu)建”（戳鏈接了解詳情）。本期，小翌重點(diǎn)聊聊pG-Tn5。什么是pG-Tn5pG-Tn5(pG-Tn5Transposase)是將ProteinG(pG)與經(jīng)過改造的Tn5轉(zhuǎn)座酶進(jìn)行融合，形成的同時(shí)具備轉(zhuǎn)座酶與ProteinG活性的新型融合酶。ProteinG能特異性與抗體結(jié)合，從而使得pG-Tn5具備更高的靶向性。Tn5是一種細(xì)菌轉(zhuǎn)座子,經(jīng)改造的Tn5能夠高效地切割DNA,同時(shí)連接上特定的接頭 -
巨噬細(xì)胞清除操作及文獻(xiàn)實(shí)例分析
01巨噬細(xì)胞清除簡介巨噬細(xì)胞是體內(nèi)每個(gè)器官中都存在的細(xì)胞，存在于表皮、角膜和沒有血管的關(guān)節(jié)內(nèi)部，其體內(nèi)生物學(xué)研究的重要方法之一是巨噬細(xì)胞耗竭。清除巨噬細(xì)胞，可以全面了解巨噬細(xì)胞在病理?xiàng)l件下的功能。目前，巨噬細(xì)胞清除的主要方法包括構(gòu)建巨噬細(xì)胞缺失動(dòng)物模型和使用藥物（氯膦酸鹽脂質(zhì)體）去除法，但是，構(gòu)建巨噬細(xì)胞缺失動(dòng)物模型價(jià)格昂貴，周期長，因此，氯膦酸鹽脂質(zhì)體（ClodronateLiposomes）是目前最為成熟、方便、經(jīng)濟(jì)的一種巨噬細(xì)胞清除工具，可以有效的清除動(dòng)物體內(nèi)包括肝臟，脾臟，肺部，血液等多 -
精彩回顧 | 四企聯(lián)動(dòng)，共話病原快檢——高通量測序技術(shù)助力病原快檢與防控
精彩回顧|四企聯(lián)動(dòng)，共話病原快檢——高通量測序技術(shù)助力病原快檢與防控8月24日下午，由華大智造、吉因加、金匙醫(yī)學(xué)和翌圣生物聯(lián)合主辦的“四企聯(lián)動(dòng)，共話病原快檢——高通量測序技術(shù)助力病原快檢與防控”的云聽會落幕，這場齊聚設(shè)備商、服務(wù)商和原料商的研討會，從不同的視覺角度，為賦能病原領(lǐng)域的診斷和監(jiān)測等角度提供不同的病原快檢與防控見解，思想的碰撞為大家?guī)砹瞬≡鞕z前沿的新設(shè)備、新興技術(shù)和優(yōu)質(zhì)試劑。四企聯(lián)動(dòng)賦能病原快檢與防控華大智造DNBSEQ測序平臺加速病原檢測。華大智造帶來了全球同等通量測序儀中速度最 -
mRNA合成的關(guān)鍵步驟之一是將質(zhì)粒DNA進(jìn)行線性化，這一步需要使用限制性內(nèi)切酶，IIs型內(nèi)切酶是質(zhì)粒線性化的內(nèi)切酶，因?yàn)樗鼈冊谧R別位點(diǎn)下游切割DNA，可確保所設(shè)計(jì)的poly(A)尾的完整性，線性化后的DNA模板上不會留下“疤痕”，IVT過程中也不會添加不需要的核苷酸。BsaI是常見的IIs型內(nèi)切酶之一，在mRNA合作中起著重要作用。圖1.BsaI識別位點(diǎn)及切割序列翌圣GMP級別BsaI翌圣的BsaI由大腸桿菌重組表達(dá)，GMP標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)，酶切效率高、星號活性低、末端完整性良好，可用于mRNA疫苗生產(chǎn)
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說到RNA提取，總是避不開Trizol（此處指總RNA抽提試劑，下同），作為總RNA提取的方法，裂解能力強(qiáng)，適用范圍廣，適用動(dòng)植物組織還有小量樣本及難提取的組織，例如皮膚，結(jié)締組織，還可以用于細(xì)菌真菌等微生物的總RNA提取，優(yōu)點(diǎn)顯而易見，缺點(diǎn)也是不容忽視，Trizol它離不開氯仿??！氯仿早在2017年就被世衛(wèi)癌癥研究機(jī)構(gòu)列入2B類致癌清單了，吸入，食入，皮膚吸收，主要作用于中樞神經(jīng)，有麻醉作用，對心、肝、腎有損害，還有提取伴侶β-巰基乙醇也是危險(xiǎn)品，刺激眼睛、呼吸道粘膜，引起慢性咽炎，經(jīng)皮膚、吞
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常用報(bào)告基因有哪些種類？一文讀懂！什么是報(bào)告基因？報(bào)告基因(reportergene)是一種編碼在內(nèi)源蛋白背景下易被檢測出來的蛋白質(zhì)或酶的基因。報(bào)告基因與目的基因或調(diào)控序列相連，通過間接或直接檢測報(bào)告基因編碼產(chǎn)物的信號，比如報(bào)告蛋白、mRNA、酶等，直觀反映細(xì)胞內(nèi)基因的轉(zhuǎn)錄活性或表達(dá)水平。一般報(bào)告基因的特點(diǎn)是無毒、無免疫原性、易于檢測、具有一定的特異性。報(bào)告基因編碼產(chǎn)物的半衰期是比較關(guān)注的一個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)。編碼產(chǎn)物半衰期和報(bào)告基因的應(yīng)用領(lǐng)域息息相關(guān)。[1]那么報(bào)告基因該如何選擇呢？在選擇報(bào)告基因時(shí)一般
